植原體誘導(dǎo)下抗棗瘋病相關(guān)基因的差異表達(dá)研究.pdf

1、棗(Ziziphus jujuba Mill.)為鼠李科(Rhamnaceae)棗屬(Ziziphus Mill.)植物，是我國特有的寶貴種質(zhì)資源和重要的特色果樹。棗瘋病由植原體引起，是棗樹上最嚴(yán)重的毀滅性病害之一。利用現(xiàn)有的抗病種質(zhì)資源，借助分子生物學(xué)手段和方法克隆抗病基因，開展分子輔助育種具有重要意義。本研究利用cDNA-AFLP技術(shù)，以感病品種‘贊皇大棗’為對照，進(jìn)行了抗棗瘋病品種‘星光’在植原體侵染后不同時期相關(guān)基因的差異表達(dá)分

2、析。獲得如下結(jié)果: 1.獲得了86條差異條帶，其中26條為抗病相關(guān)條帶，14條為感病相關(guān)條帶，與植原體侵染相關(guān)的條帶18條，感病品種特有條帶24條，抗病品種特有條帶4條。應(yīng)用130對cDNA-AFLP引物對棗接種病原侵染前后的全部cDNA進(jìn)行了分析和比對，獲得20對能擴(kuò)增出抗棗瘋病品種不同時期與對照樣品之間的差異表達(dá)量或者差異表達(dá)條帶的AFLP引物，引物Eaa/Mgt擴(kuò)增出的1條400bp差異表達(dá)片段，只出現(xiàn)在抗病品種病原侵染后

3、的樣品中。引物Ec/Maa擴(kuò)增結(jié)果顯示在250bp處有1條帶與植原體侵染有關(guān)，非抗病相關(guān)也非感病相關(guān)。 2.確定了‘星光’，抗病機(jī)制誘導(dǎo)產(chǎn)生的不同時期。通過對嫁接侵染后55d到115d‘星光’體內(nèi)產(chǎn)生的差異表達(dá)條帶的數(shù)量進(jìn)行分析，認(rèn)為侵染后55d～75d為抗病機(jī)制的啟動期，75d～115d是抗病機(jī)制的充分表達(dá)期，到115d以后進(jìn)入抗病機(jī)制產(chǎn)生后的穩(wěn)定期。 3.初步確定了一條與棗瘋病抗性相關(guān)的核酸序列，長度233bp?；厥?/p>