藥用植物種子種苗DNA條形碼鑒定與應(yīng)用.pdf

1、中藥材種質(zhì)資源的準(zhǔn)確鑒定對(duì)國(guó)家藥用植物種質(zhì)資源保存和藥材質(zhì)量提高均具有重要意義。目前，針對(duì)中藥材種質(zhì)資源鑒定的方法學(xué)研究尚不多見(jiàn)。本研究以DNA條形碼技術(shù)為主，結(jié)合形態(tài)學(xué)鑒定，建立中藥材種質(zhì)資源鑒定的方法學(xué)體系。首先從澤瀉種子入手，取56份樣品進(jìn)行研究，結(jié)果表明澤瀉Alismaplantago-aquatica和東方澤瀉Alisma orientale種子外觀形態(tài)相似;兩個(gè)物種的ITS2序列長(zhǎng)度均為311bp，GC含量為56.9％，IT

2、S2序列在165 bp處存在T-A變異。在此基礎(chǔ)上，對(duì)芍藥、牡荊、漆樹(shù)、商陸、銀柴胡、蘇木、苘麻、香薷、草珊瑚10種中藥材種子，共98份樣品進(jìn)行鑒定，研究結(jié)果表明ITS2序列能夠成功鑒定芍藥、漆樹(shù)、銀柴胡、蘇木、苘麻、香薷、草珊瑚、車(chē)前8種中藥材種子的基原物種分別為芍藥Paeonia lactiflora.、漆樹(shù)Toxicodendron vernicifluum、銀柴胡Stellaria dichotoma、蘇木Caesalpinia

3、 sappan、苘麻Abutilon theophrasti、香薷Mosla chinensis、草珊瑚Sarcandra glabra、車(chē)前Plantago asiatica，同時(shí)發(fā)現(xiàn)有些種子鑒定結(jié)果與樣品標(biāo)簽不一致。psbA-trnH序列能夠準(zhǔn)確鑒定商陸藥材種子的基原物種為垂序商陸Phytolacca americana。ITS2序列鑒定牡荊藥材種子基原物種為穗花牡荊Vitex agnus-castus或黃荊Vitex negund

4、o，psbA-trnH序列鑒定其基原物種為牡荊Vitex negundo var.cannabifolia或黃荊Vitex negundo。然后，以常山Dichroa febrifuga種苗作為代表，為確定其取樣范圍，以TCMGIS進(jìn)行產(chǎn)地適宜性分析，根據(jù)分析結(jié)果共采集到13份常山種苗、1份果實(shí)和35份常山藥材樣品以及14份混偽品樣本，研究結(jié)果顯示常山ITS2序列長(zhǎng)度為232 bp，序列中共有4個(gè)變異位點(diǎn)，分別為6位點(diǎn)C-T變異，24位