子癇前期母血有核紅細胞數(shù)量和T淋巴細胞的變化及意義.pdf

1、子癇前期是孕婦和圍產(chǎn)兒病率及死亡率的主要原因之一，病因至今未明，隨著現(xiàn)代生殖免疫學發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)子癇前期可能是一種母胎免疫不相容疾病。胚胎是由繼承了父系及母系雙重組織特異性受精卵發(fā)育而來，所以它對母體來說具有“自己”和“異己”的組織抗原特性。正常的胎盤并非是細胞密不可透的屏障，在人類的妊娠中，胎兒血液可能進入母體血液循環(huán)中。理論上母體對攜帶有父系抗原的胎兒細胞會產(chǎn)生免疫反應，但是正常妊娠期間并沒有發(fā)生母胎排斥現(xiàn)象，說明母胎之間存在復雜而

2、完整的免疫耐受體系，一旦這種平衡被打破則導致病理妊娠，如流產(chǎn)、子癇前期等。從孕婦外周血分離出的胎兒細胞的類型主要有滋養(yǎng)細胞、淋巴細胞、粒細胞、胎兒有核紅細胞4種。目前主要是通過分離外周血胎兒有核紅細胞進行產(chǎn)前診斷或妊娠相關疾病的研究。其原因以下：1．胎兒有核紅細胞生命周期較短，不受既往妊娠的干擾；2．含有全套的DNA遺傳信息，分離出來可直接用來進行遺傳學分析；3．在其表面有多種特異性抗原如轉鐵蛋白受體等，能有效地從孕婦外周血中分離出來。

3、孕婦外周血50％有核紅細胞為胎兒來源，故定量分析孕婦外周血有核紅細胞可反映孕婦外周血胎兒抗原的水平。國外有學者發(fā)現(xiàn)，子癇前期外周血有核紅細胞增多，并發(fā)生在臨床出現(xiàn)之前，但胎兒抗原成分增多在子癇前期發(fā)病的免疫學機制起什么作用還不十分清楚。本研究目的通過應用流式細胞技術檢測子癇前期孕婦外周血有核紅細胞比例及細胞免疫功能的變化并與正常妊娠及未孕婦女進行比較，了解子癇前期患者胎兒抗原數(shù)量的變化對母體免疫功能的影響及與病情輕重的關系，從而對子癇前

4、期發(fā)病機制有所認識。 【材料與方法】 1．研究對象 選擇2005年11月至2006年6月在暨南大學第二臨床醫(yī)學院住院的子癇前期患者32例作為病例組，所有病例均符合《婦產(chǎn)科學》第六版子癇前期的診斷標準，其中重度組19例，輕度組13例。另選擇同期住院分娩的健康孕婦30例作為正常妊娠對照。所有孕婦均為單胎妊娠，年齡20～35歲，既往無慢性高血壓、糖尿病、腎炎、心臟病等內(nèi)科疾病，血紅蛋白≥100g／L，無吸煙、吸毒等不良

5、嗜好，無輸血、移植、免疫治療病史。選取同期來我院正常身體檢查，年齡20-35歲，未孕的健康婦女30例作為未孕對照組。 2．實驗方法 2.1外周血淋巴細胞比例檢測：采用流式細胞儀定量檢測三組外周血中CD3<'+>、CD3<'+>CD4<'+>、CD3<'+>CD8<'+>、CD3<'+>CD4<'+>／CD3<'+>CD8<'+>、CD3<'->CD56+16<'+>淋巴細胞百分比。 2.2外周血有核紅細胞比例檢測

6、：應用單密度梯度分離法分離孕婦外周血單個核細胞層，應用CD71-FITC，CD13-PE，CD45-Cychrome三種抗體標記細胞，采用流式細胞儀劃分CD71<'+>／CD13<'->CD45。區(qū)域，計算有核紅細胞占單個核細胞的百分比，選擇臍血作為陽性對照及未孕婦女外周血作為陰性對照。 3．統(tǒng)計學處理 實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用SPSS11.0版本軟件包進行統(tǒng)計分析，測定結果以x±s表示，各組的年齡、孕次、孕周、平均動脈壓及外周

7、血淋巴細胞比例及有核紅細胞比例采用獨立樣本均數(shù)t檢驗。外周血有核紅細胞比例與淋巴細胞水 平及平均動脈壓相關性應用秩相關分析，計算Spearman相關系數(shù)。 【結果】 1、一般情況：將未孕組、正常妊娠組、病例組的年齡、孕次進行比較，各組之間比較無顯著性差異(P>0.05)，病例組與正常妊娠組的孕周比較無差異性。病例組MAP(平均動脈壓)與正常妊娠組比較明顯升高(P<0.05)。 2、外周血淋巴細胞比例的比較：病例

8、組與正常妊娠組比較，總T淋巴細胞無差異性，CD4<'+>T細胞增加(P<0.001)，CD8<'+>T細胞下降(P<0.001)，(2D4<'+>／CD8<'+> 升高(P<0.001)，與未孕比較無差異性(P>0.05)；病例組NK細胞與正常妊娠無差異性，重度組較輕度組明顯升高(P<0.001)。 3、外周血有核紅細胞比例比較：未孕婦女外周血幾乎不含有有核紅細胞，有核紅細胞陽性表達率0.034±0.026％；正常妊娠組有核紅

9、細胞比例0.96± 0.85％，病例組2.74±1.08％，較正常妊娠組有顯著性差異(P<0.001)；將病例組按病情程度分為輕度及重度兩組并與正常比較，兩兩比較均有顯著性差異(P<0.01)。 4、子癇前期外周血有核紅細胞數(shù)量與外周血淋巴細胞水平相關性分析：對子癇前期外周血CD3<'+>、CD4<'+>、CD8<'+>、CD4<'+>／CD8<'+>、NK細胞進行相關分析，發(fā)現(xiàn)子癇前期外周血有核紅細胞比例與CD4<'+>／C

10、D8<'+>正相關，r=0.838，P<0.001;與CD8<'+>細胞呈負相關，r=-0.769，P<0.001． 5、子癇前期外周血有核紅細胞數(shù)量與平均動脈壓相關性分析：子癇前期外周 血有核紅細胞比例與平均動脈壓呈正相關，r=0.689，P<0.001． 【結論】 1、子癇前期患者外周血中有核紅細胞數(shù)量較正常孕婦升高，說明子癇前期的發(fā)病與進入母體內(nèi)的胎兒抗原成分增多有關。 2、子癇前期孕婦體內(nèi)T淋巴