濾泡輔助性T淋巴細胞和B淋巴細胞在慢性乙型肝炎治療中的變化研究.pdf

1、目的：研究濾泡輔助性T淋巴細胞和B淋巴細胞在慢性乙型肝炎發(fā)病機制中的作用。本研究以使用長效干擾素進行抗乙肝病毒治療的慢性乙型肝炎患者為研究對象，檢測其外周血中Tfh細胞和B細胞比例，觀察隨訪治療過程中Tfh細胞和B細胞比例的變化，分析二者之間的相關(guān)性和患者臨床指標之間的相關(guān)性；檢測與Tfh細胞和B細胞的分化和功能相關(guān)的細胞因子的濃度，以及它們與患者臨床指標之間的相關(guān)性。
　　方法：
　　選取慢性乙型肝炎患者作為研究對象，血清

2、HBeAg陽性，且HBV-DNA定量>106copies/ml（或>20,000IU/ml），Child-Pugh評分為A級，此前未接受過干擾素或核苷（酸）類似物等抗病毒藥物的治療，使用長效干擾素治療。隨訪基線、1W、2W、4W、8W、12W、16W、24W患者的肝功、HBV-DNA定量及兩對半定量的變化，同時抽取患者外周血，采用單克隆抗體進行細胞表面染色，并運用流式細胞儀檢測Tfh細胞、B淋巴細胞的比例，分析治療過程中Tfh細胞和B細

3、胞比例的變化趨勢，分析Tfh細胞與B細胞之間的相關(guān)性，分別分析Tfh細胞和B淋巴細胞變化與患者肝功、HBV-DNA定量及HBsAg定量、HBeAg定量之間的相關(guān)性。檢測與Tfh細胞分化和功能相關(guān)的表面分子的濃度，分析各細胞因子的變化趨勢，以及是否與患者臨床指標變化相關(guān)。
　　結(jié)果：
　　長效干擾素治療過程中CD19+CD38+/Lym％即漿細胞在治療過程中變化明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；而外周血中Tfh細胞、B細

4、胞和CD4+T細胞占淋巴細胞的比例在治療過程中的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。漿細胞比例在治療的前4周呈逐漸下降趨勢，以后漿細胞比例逐漸回升至基線水平或高于基線水平，呈“V”型變化，在治療4W時為最低點。循環(huán)Tfh細胞比例在干擾素治療過程中的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。在相關(guān)性方面，漿細胞比例和B淋巴細胞呈正相關(guān)（r=0.492，P<0.01），外周血Tfh細胞和CD4+T細胞之間，以及外周血Tfh細胞和B淋巴細胞之間均無明顯相關(guān)性（P>0.05）。

5、　　患者HBV-DNA定量在治療過程中變化明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；ALT在長效干擾素治療過程中差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。HBV-DNA定量、ALT均隨治療時間呈下降趨勢。治療過程中TP的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而反映肝臟合成功能的指標白蛋白（A）的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）?？偰懠t素（TB）為12.84±6.87（mol/L），均低于正常高限，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。在相關(guān)性方面HBV-

6、DNA定量的下降同肝功能復(fù)常呈正相關(guān)（r=0.322，P<0.01），我們對外周血Tfh細胞、B細胞、漿細胞和CD4+T細胞占淋巴細胞的比例和患者的各項臨床指標進行多變量相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，漿細胞和總蛋白呈正相關(guān)（r=0.318，P<0.01），這應(yīng)該與漿細胞的功能有關(guān)，隨著漿細胞分泌大量免疫球蛋白，外周血中的總蛋白含量自然隨之升高，外周血Tfh細胞、B細胞和CD4+T細胞占淋巴細胞的比例同各項臨床指標都不存在相關(guān)性（P>0.05），漿細胞

7、同HBV-DNA定量、白蛋白（A）及谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）不存在相關(guān)性（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　慢性乙型肝炎患者漿細胞水平明顯增高，在長效干擾素抗乙肝病毒治療過程中差異有統(tǒng)計學(xué)意義，治療初期由于干擾素的骨髓抑制作用迅速下降，后期逐漸回升。循環(huán)Tfh細胞在治療過程中的無明顯差異，HBV-DNA定量和ALT在治療過程中均呈下降趨勢，二者呈正相關(guān)?？紤]到Tfh細胞位于淋巴濾泡，外周血Tfh細胞不能真正反映機體Tfh細胞真實