慢性乙型肝炎免疫耐受和免疫清除期淋巴細胞基因表達譜的差異.pdf

1、目的: 乙型肝炎病毒（HBV）是導致肝臟疾病的主要致病因子，許多的慢性乙型肝炎患者最終可發(fā)展成為肝硬化和原發(fā)性肝癌。迄今為止，乙型肝炎的發(fā)病機理和HBV引發(fā)免疫耐受的機制尚未完全闡明。本課題研究慢性乙型肝炎患者免疫耐受期和免疫清除期體內淋巴細胞基因表達譜的差異，探討差異表達基因與HBV感染引起的免疫耐受及免疫清除的關系。 方法: 選擇慢性乙型肝炎（HBsAg、HBeAg、HBcAb陽性）病例，根據(jù)丙氨酸氨基轉移酶

2、（ALT）高低劃分免疫耐受組、免疫清除組：以健康查體者為正常對照組。采集新鮮血液，EDTA抗凝，淋巴細胞分離液分離淋巴細胞，一步法提取總RNA，用逆轉錄法標記cDNA探針，熒光染料Cy3標記正常對照組，Cy5標記免疫耐受組和免疫清除組。采用高通量基因表達譜芯片（7，267個基因）進行芯片雜交，使用ScanArray Express共聚焦掃描儀掃描基因芯片，PerkinElmer LAS軟件進行數(shù)據(jù)分析。 結果: 比較免疫

3、耐受組與正常對照組發(fā)現(xiàn)差異表達基因419個，表達上調206個，下調213個；免疫清除組與免疫耐受組差異表達基因共213個，上調111個，下調102個；兩組共有但差異表達方向相反的基因47個，在免疫耐受期表達下調但免疫清除期上調6個，在免疫耐受上調免疫清除期下調41個。 結論: 使用表達譜基因芯片檢測慢性乙型肝炎患者免疫耐受、免疫清除期淋巴細胞的基因表達，結合HBV感染的自然史，初步建立了HBV免疫耐受及免疫清除發(fā)生時淋巴