大鼠單側(cè)視神經(jīng)損傷致雙側(cè)視網(wǎng)膜細(xì)胞變化的研究.pdf

1、目的：
　　觀察大鼠單側(cè)視神經(jīng)橫斷傷后雙側(cè)眼視網(wǎng)膜膠質(zhì)細(xì)胞隨時(shí)間的變化特點(diǎn)，檢測對側(cè)眼視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡變化。
　　方法：
　　健康成年Fischer344大鼠，8-12周齡，共86只。分兩組：實(shí)驗(yàn)組腹腔麻醉后右眼球后2-3mm行視神經(jīng)橫斷，左眼不作處理，對照組暴露視神經(jīng)但未損傷。損傷后3天、1周、2周、3周、6周、12周取雙側(cè)眼球，行石蠟切片HE染色觀察視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層細(xì)胞變化，視網(wǎng)膜鋪片免疫熒光組織化學(xué)特異性抗體

2、標(biāo)記觀察大膠質(zhì)細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞密度和形態(tài)，對損傷后3周組行雙眼視網(wǎng)膜鋪片免疫組織化學(xué)觀察視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的存活，石蠟切片TUNEL檢測視網(wǎng)膜凋亡并與視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞共染觀察視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡情況。數(shù)據(jù)分析多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用Bonferroni或DunnettT3檢驗(yàn)。
　　結(jié)果:
　　HE染色示損傷眼視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層數(shù)目減少，細(xì)胞核廣泛縮小，對側(cè)眼視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層數(shù)目輕度減少，細(xì)胞核形態(tài)不規(guī)則，

3、胞漿空泡改變。視網(wǎng)膜鋪片免疫組化顯示損傷側(cè)視網(wǎng)膜內(nèi)層小膠質(zhì)細(xì)胞密度增加胞體增大變形，分支減少，對側(cè)眼小膠質(zhì)細(xì)胞分支點(diǎn)減少。3天開始雙眼müller細(xì)胞表達(dá)GFAP。上述膠質(zhì)細(xì)胞變化1～3周較為明顯，6周后已基本恢復(fù)。3周時(shí)，損傷側(cè)眼視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞存活密度為413.87/mm2，對側(cè)眼為1046.01/mm2，與對照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。損傷側(cè)視網(wǎng)膜凋亡細(xì)胞較多，對側(cè)眼局部、少量凋亡，凋亡細(xì)胞與視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞共染