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文檔簡介
1、目的:建立實驗性大鼠視神經不同程度不全損傷模型,在此基礎上觀察重組人睫狀神經營養(yǎng)因子對視神經不全損傷后視網膜節(jié)細胞的保護作用.方法:用同一把大號無創(chuàng)血管夾在球后1.5mm處分別鉗夾成年大鼠視神經5秒、10秒、20秒、40秒,7天后取材觀察不同致傷量對視神經病理、超微結構的影響;鉗夾前及鉗夾后即時、3天、7天、14天、28天時觀察F-VEP變化情況,并以軸突占視神經橫截面積的比例和F-VEP恢復程度作為劃分損傷程度的標準.以大鼠視神經中度
2、損傷為模型,實驗組傷后即時、7天、14天、28天時玻璃體腔內注射rhCNTF溶液2μl(1μl/μl),對照組注射等量蒸餾水(rhCNTF溶劑).傷后7天、14天、28天、56天取材檢測.1.取材前48小時每組部分大鼠用粒藍逆行標記RGCs,48小時后取視網膜熒光顯微鏡下觀察、計數(shù)RGCs密度.2.用RT-PCR方法檢測、觀察rhCNTF對視網膜組織表達GAP-43mRNA影響.3.用免疫組化方法檢測、觀察rhCNTF對視網膜組織GAP
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