銀杏葉提取物改善發(fā)育期癲癇大鼠學(xué)習(xí)記憶功能及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：目前，學(xué)習(xí)記憶等認(rèn)知功能障礙是癲癇兒童在臨床診斷和治療中的常見(jiàn)問(wèn)題，并且不同程度地影響了患兒的學(xué)習(xí)和生活。如何降低或消除認(rèn)知功能障礙對(duì)癲癇患兒學(xué)習(xí)生活質(zhì)量的影響已成為患兒、家長(zhǎng)和兒科醫(yī)生非常關(guān)心的一個(gè)非常重要的社會(huì)問(wèn)題。事實(shí)上，目前對(duì)癲癇兒童認(rèn)知功能障礙的機(jī)制尚不完全清楚，臨床也缺乏較好的處理措施。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外將銀杏葉提取物(EGb)作為一種中樞神經(jīng)賦活劑廣泛應(yīng)用于治療腦動(dòng)脈硬化、腦梗塞等疾病所致的后遺癥和老年神經(jīng)精神癥狀如注意力

2、不集中、記憶力減退、意識(shí)模糊等，臨床上明顯地改善了腦功能不全病人的學(xué)習(xí)記憶能力，因而被認(rèn)為是一種“認(rèn)知增強(qiáng)劑”。但是EGb對(duì)發(fā)育中癲癇兒童的學(xué)習(xí)記憶等認(rèn)知功能障礙是否有作用，目前還未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)旨在探討EGb對(duì)癲癇點(diǎn)燃模型幼鼠學(xué)習(xí)記憶等認(rèn)知功能的影響及可能機(jī)制，為臨床應(yīng)用EGb治療癲癇兒童認(rèn)知功能障礙提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：21d、35d不同日齡SD幼年大鼠，首先經(jīng)Y型電迷宮初步篩選后給予腹腔注射(ip)戊四氮(PTZ)制作癲癇

3、點(diǎn)燃發(fā)作模型，再將各日齡組隨機(jī)分為生理鹽水對(duì)照組(NS)、點(diǎn)燃對(duì)照組(PTZ)、EGb大(PTZ+EGb1)、中(PTZ+EGb2)、小(PTZ+EGb3)劑量治療組。EGb灌胃給藥，以Y型電迷宮學(xué)習(xí)記憶行為訓(xùn)練方法觀察大鼠學(xué)習(xí)記憶等認(rèn)知功能，堿羥胺比色法、免疫組織化學(xué)染色方法分別檢測(cè)海馬乙酰膽堿酯酶(AChE)、膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(CHAT)的活性及N-甲基-D-天冬氨酸受體1(NMDAR1)的表達(dá)，并觀察EGb治療后對(duì)這些結(jié)果的影響。

4、 結(jié)果： 1.治療前大鼠電迷宮試驗(yàn)達(dá)標(biāo)所需電擊次數(shù)：不同日齡的各個(gè)點(diǎn)燃組與各自NS組相比，達(dá)到學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)所需的電擊次數(shù)明顯增多(P<0.01)；21d日齡段與35d日齡段的PTZ點(diǎn)燃組相互比較，前者達(dá)標(biāo)次數(shù)亦明顯增多(P<0.05)。 2.EGb治療后大鼠電迷宮試驗(yàn)達(dá)標(biāo)所需電擊次數(shù)：不同EGb劑量的各治療組大鼠達(dá)到學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)的次數(shù)均明顯少于同齡PTZ組(P<0.01)，而同齡EGb大、中、小劑量治療組相互比較，達(dá)到學(xué)會(huì)

5、標(biāo)準(zhǔn)所需的電擊次數(shù)隨治療劑量的減少呈劑量依賴(lài)性遞增(P<0.01)；EGb各劑量治療組與治療前比較，達(dá)標(biāo)次數(shù)明顯減少(P<0.01或P<0.05)，而NS組、PTZ組較治療前沒(méi)有明顯差異(P>0.05)。 3.海馬AChE、ChAT的活性：兩個(gè)日齡幼鼠PTZ組海馬AChE活性及ChAT活性均明顯低于各自的NS組(P<0.01)；各EGb治療組與其同齡PTZ組相比，隨治療劑量的增加，AChE活性逐漸降低、ChAT活性則逐漸提高，呈

6、劑量依賴(lài)性(P<0.01)；各組的兩個(gè)年齡段之間AChE、ChAT的活性均未示明顯差異(P>0.05)。 4.NMDAR1免疫組織化學(xué)染色：NMDAR1陽(yáng)性細(xì)胞在各組大腦皮質(zhì)各層內(nèi)彌散分布，在海馬主要分布于CA1、CA3區(qū)錐體細(xì)胞層及齒狀回顆粒細(xì)胞層。陽(yáng)性細(xì)胞表現(xiàn)為圓或橢圓形，大小不一，胞膜及胞漿內(nèi)見(jiàn)棕黃色免疫反應(yīng)產(chǎn)物，以胞膜著色為主。各日齡PTZ組NMDAR1免疫反應(yīng)產(chǎn)物COD值較各自NS組明顯增強(qiáng)(P<0.01)；不同日齡各

7、治療組與各自PTZ組比較，隨治療劑量的增加，NMDAR1免疫反應(yīng)產(chǎn)物COD值逐漸降低，差異均有顯著性(P<0.01)；對(duì)各組不同日齡段之間進(jìn)行比較，除PTZ組(P<0.01)外，其余各組間均無(wú)明顯差異(P>0.05)。 結(jié)論： 1.點(diǎn)燃模型中的反復(fù)癇性發(fā)作可以導(dǎo)致幼鼠學(xué)習(xí)記憶功能明顯下降。 2.癲癇發(fā)病年齡越早，學(xué)習(xí)記憶功能受損越嚴(yán)重。 3.EGb可以明顯改善發(fā)育期不同日齡點(diǎn)燃模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能，而且