中藥蘆薈大黃素光動(dòng)力治療對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7增殖、凋亡、侵襲、遷移的體外觀測(cè).pdf

1、目的：
　　通過(guò)研究蘆薈大黃素(aloe emodin，AE)復(fù)合光動(dòng)力對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖、凋亡、侵襲、遷移的影響，探討AE-PDT的作用機(jī)制。
　　方法：
　　AE-PDT對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的毒性作用用WST-8檢測(cè)；Edu染色和克隆實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的增殖狀態(tài);細(xì)胞的凋亡被Anne-V/PI雙染流式和Hoechst染色檢測(cè);JC-1染色通過(guò)綠色熒光/紅色熒光的比值反應(yīng)線粒體膜電位及凋亡情況;Transwe

2、ll實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞遷移、侵襲的情況；活性氧物質(zhì)（ROS）的水平用DCFH-DA染色檢測(cè); Phalloidin-TRITC染色觀察細(xì)胞骨架 F-actin的變化；Western blot檢測(cè)Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2Nrf2、VEGF、MMP2、MMP9、BIP、Chop蛋白表達(dá)的變化。
　　結(jié)果：
　　WST-8試劑盒檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：AE-PDT(AE：10μmol/L，光功率：40mW/cm2，時(shí)間：30

3、0s)對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞有明顯的毒性作用，其毒性作用呈一定的劑量效應(yīng)關(guān)系(P＜0.05);Edu和克隆實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)AE-PDT組細(xì)胞的增殖抑制作用較空白對(duì)照組、單純AE組、單純光照組明顯(P＜0.05)；Anne-V/PI雙染流式發(fā)現(xiàn)AE-PDT對(duì)人乳腺癌MCF7細(xì)胞發(fā)生死亡的幾率明顯升高(P＜0.05);細(xì)胞核固縮、碎裂和凋亡小體可在AE-PDT組被Hoechst染色觀察;JC-1熒光染色發(fā)現(xiàn)AE-PDT組細(xì)胞膜電位明顯下降(P＜0

4、.05)；Transwell實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)AE-PDT對(duì)MCF-7細(xì)胞遷移、侵襲能力有顯著的抑制作用(P＜0.05)；AE-PDT組ROS水平升高被DCFH-DA熒光染色發(fā)現(xiàn);Phalloidin-TRITC染色觀察到AE-PDT可以顯著的抑制細(xì)胞骨架的重組(P＜0.05)；Western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)Caspase-9、BIP、Chop、VEGF、Nrf2、MMP2 MMP9蛋白表達(dá)呈現(xiàn)早期升高晚期恢復(fù)原來(lái)水平的趨勢(shì)(P＜0.05)，