發(fā)根農(nóng)桿菌Ri質(zhì)粒轉(zhuǎn)化甘草的研究.pdf

1、甘草(Glycyrrihizag)屬于豆科(Leguminosae)甘草屬(Glycyrrhiza)灌木狀多年生草本植物，以根和莖入藥，是最常見的藥用作物之一。在《神農(nóng)本草經(jīng)》中亦列為上品，具有補(bǔ)脾益氣、清熱解毒、潤肺止咳、緩急止痛、調(diào)和諸藥等之功效。甘草多年來一直是國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。除藥用價值外，甘草在食品、飲料、卷煙、化妝品等工業(yè)中有著重要的作用，需求的日益增加僅依靠從野生藥用植物中提取有用的次生代謝產(chǎn)物勢必導(dǎo)致大量消耗野生藥用植物

2、資源，甚至導(dǎo)致物種滅絕。人工栽培，周期長，部分藥用成分含量降低。而采用組織培養(yǎng)技術(shù)可以控制植物生長環(huán)境，加快其繁殖速度，并可以從細(xì)胞培養(yǎng)物直接提取有效成分。為了更深入的了解甘草及保護(hù)其野生資源，本研究進(jìn)行了以下方面的工作：以烏拉爾甘草為材料，用發(fā)根農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化甘草，并誘導(dǎo)發(fā)狀根愈傷組織，探討了激素等對愈傷組織的影響，為植株再生和從培養(yǎng)物中直接提取有效成分奠定基礎(chǔ)。其研究結(jié)果如下： 1、本實驗利用發(fā)根農(nóng)桿菌成功誘導(dǎo)出了甘草發(fā)狀根，A

3、4對子葉誘導(dǎo)率最高，預(yù)培養(yǎng)時間為2天，共培養(yǎng)時間為4天最佳，除菌濃度Cef(300mg/L)。 2、MS為甘草發(fā)狀根最佳培養(yǎng)基，最佳培養(yǎng)條件：交替光照，23℃，暗培養(yǎng)30天為一周期 3、發(fā)狀根細(xì)胞生長曲線為近“S”型，對數(shù)生長期在10-20天，蔗糖消耗量在對數(shù)生長期最大，NH4+的消耗主要在對數(shù)生長期前后，25天以后趨于穩(wěn)定。由此斷定，在接種后25-30天是收獲甘草細(xì)胞適宜時期。 4、檢測了不同愈傷組織的可溶性多