舟山眼鏡蛇毒CTXn對6-OHDA誘導(dǎo)的帕金森病動物模型的療效觀察.pdf

1、目的：
　　 1、探討通過完全損傷黑質(zhì)建立帕金森?。≒D）異動癥動物模型的可行性。
　　 2、研究舟山眼鏡蛇毒CTXn對PD動物模型的治療效果。
　　 方法：
　　 1、分別運用大劑量和中劑量6-OHDA建立黑質(zhì)完全損傷和部分損傷的動物模型；以轉(zhuǎn)棒試驗（Rota Rod Test）和圓筒試驗（Cylinder Test）評估模型大鼠運動功能；運用異常不自主運動（AIM）評分方法評估左旋多巴（L-DOPA）

2、誘導(dǎo)的模型大鼠的異動行為；通過免疫組織化學染色檢測模型大鼠的黑質(zhì)TH陽性細胞；運用高效液相檢測模型大鼠的紋狀體多巴胺含量。
　　 2、通過大劑量6-OHDA完全損傷黑質(zhì)建立PD異動癥模型，運用CTXn（安慰劑對照用生理鹽水）進行預(yù)處理，然后運用轉(zhuǎn)棒試驗評測大鼠運動協(xié)調(diào)能力，運用L-DOPA誘導(dǎo)大鼠發(fā)生的異常不自主運動（AIM）行為。
　　 3、通過中劑量6-OHDA部分損傷黑質(zhì)建立PD模型，運用尼古丁或/和 CTXn進行

3、預(yù)處理，然后運用轉(zhuǎn)棒試驗評測模型大鼠的運動協(xié)調(diào)能力、運用APO誘導(dǎo)模型大鼠發(fā)生旋轉(zhuǎn)行為。
　　 4、通過中劑量6-OHDA部分損傷黑質(zhì)建立PD模型，運用CTXn（安慰劑對照組用生理鹽水）連續(xù)腹腔注射2周，然后運用轉(zhuǎn)棒試驗評測模型大鼠的運動協(xié)調(diào)能力、運用APO誘導(dǎo)模型大鼠發(fā)生旋轉(zhuǎn)行為，再行免疫組化染色觀察紋狀體ChAT陽性細胞、多巴胺D2受體陽性細胞和黑質(zhì)TH陽性細胞數(shù)量。
　　 結(jié)果：
　　 1、大劑量6-OHD

4、A建立黑質(zhì)完全損傷動物模型的成功率為71％，死亡率為7％。
　　 2、黑質(zhì)完全損傷大鼠模型在Rota Rod試驗轉(zhuǎn)棒上的滯留時間為假手術(shù)對照組的55.3％；在圓筒試驗中損傷側(cè)前肢觸壁次數(shù)占雙側(cè)觸壁總數(shù)的比例為19.6％；在首次給予L-DOPA或APO誘導(dǎo)下，均可表現(xiàn)出AIM行為，AIM評分隨L-DOPA劑量的增加而上升；損傷側(cè)黑質(zhì)TH陽性細胞丟失達98％以上，其紋狀體內(nèi)多巴胺DA的含量為對側(cè)的0.94％。
　　 3、對于

5、異動癥大鼠模型，CTXn降低了L-DOPA誘導(dǎo)的各項AIM行為評分，同時，CTXn急性干預(yù)對正常大鼠和異動癥模型均沒有明顯降低其運動能力。
　　 4、對于PD大鼠模型，尼古丁顯著降低了模型大鼠運動協(xié)調(diào)能力，而CTXn不影響尼古丁的作用；CTXn急性干預(yù)降低了模型大鼠運動協(xié)調(diào)能力、減少了APO誘導(dǎo)的旋轉(zhuǎn)行為；CTXn慢性干預(yù)2周后模型大鼠的運動協(xié)調(diào)能力有所改善；CTXn慢性干預(yù)2周后，損傷側(cè)紋狀體區(qū)多巴胺D2受體陽性細胞的表達明顯