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文檔簡介
1、目的:探討沉默信息調(diào)節(jié)因子2相關(guān)酶1(SIRT1)在骨性關(guān)節(jié)炎(OA)滑膜組織及細(xì)胞中的相關(guān)性表達(dá)。
方法:①OA組:因膝骨性關(guān)節(jié)炎行全膝關(guān)節(jié)置換術(shù)中所取標(biāo)本共20例,男10例,女10例,年齡62-78歲,中位年齡72.3歲。納入標(biāo)準(zhǔn):符合美國風(fēng)濕病學(xué)會2001年推薦OA診斷標(biāo)準(zhǔn);②正常對照組:因急性外傷致下肢截肢術(shù)或因脛骨平臺骨折行開放復(fù)位內(nèi)固定術(shù)中所取標(biāo)本10例,男6例,女4例,年齡19-42歲,中位年齡34.2歲。納入保
2、準(zhǔn):術(shù)后病理學(xué)診斷關(guān)節(jié)無病變。標(biāo)本離體后無菌狀態(tài)下放置于裝有生理鹽水的無菌標(biāo)本盒中,2 h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行滑膜細(xì)胞的分離與培養(yǎng)。用甲苯胺藍(lán)染色對滑膜細(xì)胞進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)觀察,用免疫組化法檢測滑膜細(xì)胞 SIRT1表達(dá)及分布特點(diǎn),用Western blot法檢測滑膜組織及細(xì)胞中SIRT1表達(dá)。
結(jié)果:
1、甲苯胺藍(lán)染色顯示:滑膜細(xì)胞大部分呈梭形,兩極胞突細(xì)長,末端多與臨近細(xì)胞相連,交織成網(wǎng)狀,網(wǎng)間可見少部分小星型或多邊形細(xì)胞
3、。正常組與OA組滑膜細(xì)胞無明顯形態(tài)學(xué)差異。
2、免疫組化結(jié)果顯示:在正常組及OA組滑膜細(xì)胞中SIRT1均可見陽性表達(dá),胞質(zhì)廣泛呈棕黃色,細(xì)胞核及細(xì)胞膜未見明顯黃染,OA組與正常組對比染色強(qiáng)度下降顯著,兩者之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=20.208,P﹤0.01)。
3、Western blot法結(jié)果顯示:OA患者滑膜組織及細(xì)胞中SIRT1表達(dá)低于正常組,正常組與OA組灰度值經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=7.
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