不同時間灌服氫氯噻嗪對大鼠血壓與腎素-血管緊張素系統(tǒng)近日節(jié)律的影響.pdf

1、目的：生物節(jié)律是自然界最普遍的一種現(xiàn)象。無論是低等的單細(xì)胞藻類還是包括人類在內(nèi)的高等的動植物，生物的周期現(xiàn)象普遍存在于生命系統(tǒng)的各個層次中，這種節(jié)律現(xiàn)象有助于生命體更好的適應(yīng)周圍環(huán)境的變化。依照節(jié)律的周期長短可將之分為三種類型：1.近日節(jié)律(circadian rhythm，或晝夜節(jié)律，diurnal rhythm)，節(jié)律周期接近24小時；2.超日節(jié)律(ultradian rhythm)，節(jié)律周期明顯短于24小時；3.亞日節(jié)律(infr

2、adian rhythm)，節(jié)律周期顯著長于24小時。在人類和動物界中最為常見且研究最多的是晝夜節(jié)律，它是由生命體內(nèi)在的生物鐘(biological clocks)周期振蕩所產(chǎn)生。心血管系統(tǒng)的多數(shù)生理與病理現(xiàn)象均屬此類。近年研究發(fā)現(xiàn)，人體血壓呈現(xiàn)典型的晝夜節(jié)律特征，即晝高夜低型。血壓晝夜節(jié)律的維持有賴于多種因素，其中腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)發(fā)揮了重要作用。該系統(tǒng)是調(diào)節(jié)人體血壓、水、電解質(zhì)和保持人體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的重要系統(tǒng)。血壓晝夜節(jié)律

3、異常不僅增加心、腦、腎等靶器官損害，而且心腦血管事件如卒中、心肌梗死的發(fā)生率和死亡率均增加。因此，維持血壓的正常節(jié)律模式具有重要的臨床意義。噻嗪類利尿劑應(yīng)用于降壓領(lǐng)域已有半個多世紀(jì)了，其降壓效果好，價格低廉，且降低心、腦血管事件的發(fā)生率和總死亡率，在高血壓治療中具有重要地位。目前，已證實人體血壓和RAS系統(tǒng)活性成分存在典型的晝夜節(jié)律現(xiàn)象，但關(guān)于常見降壓藥對RAS系統(tǒng)活性成分晝夜節(jié)律的影響研究甚少。在此背景下，以氫氯噻嗪不同時間灌服方案為

4、干預(yù)因素，探討實驗鼠血壓的晝夜節(jié)律特征及。腎素(renin)、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)的時間生物學(xué)特征，以及心肌組織AngⅡ 1 型受體(AT-1)mRNA表達水平的周期性變化，進一步從分子水平探討RAS系統(tǒng)的晝夜節(jié)律特征。 方法：清潔級健康雄性Sprague-Dawlay(SD)大鼠128只。隨機分為四大組：早07:00對照組(MC)；晚19:00對照組(NC)；早07:00灌藥組(MT)；晚19:

5、00灌藥組(NT)。灌藥組每日給予氫氯噻嗪10mg/Kg，對照組每日給予相同容積的蒸餾水。每大組各32只。每大組又分為4小組，每小組各8只。適應(yīng)性飼養(yǎng)2周后開始按上述方案飼養(yǎng)喂藥。4周后分別于同日24小時內(nèi)不同時間點(02:00，08:00，14:00，20:00)用鼠尾測壓儀測量各組大鼠血壓并處死四大組中的各一小組大鼠并取材。分別檢測大鼠血漿腎素活性(PRA)、血漿.AngⅡ的濃度、血清ACE活性、心肌組織AngⅡ的濃度和AT-1mR

6、NA的表達水平。應(yīng)用余弦擬合法分析四組實驗鼠血中及心肌組織中各指標(biāo)含量或活性的時間生物學(xué)特征，采用零振幅檢驗(zero amplitude test)評價各檢測指標(biāo)的近日節(jié)律是否存在，應(yīng)用方差分析法比較各均值之間差異的顯著性，p<0.05視為有統(tǒng)計學(xué)顯著性差異。 結(jié)果： 1.方差分析顯示，血漿PRA、AngⅡ的晝夜平均水平在早晚灌藥組(MT組與NT組)顯著高于對照組(MC組與NC組)，而MT組和NT組之間無差別。血清AC

7、E活性和心肌組織AngⅡ晝夜平均水平四組間無明顯差異。 2.方差分析顯示，早晚灌藥組能明顯降低心肌組織AT-1mRNA表達的晝夜平均水平，而MT組和NT組之間無差別。 3.余弦擬合分析及零振幅檢驗顯示，四組大鼠血漿PRA、AngⅡ、血清ACE、心肌組織AngⅡ濃度或活性均呈現(xiàn)出典型的晝夜節(jié)律性。MC組PRA、AngⅡ和ACE的峰值分別出現(xiàn)在13:33、17:28、16:31；NC組三者的峰值分別出現(xiàn)在13:36、17:2

8、7、16:05，與MC組無明顯差別；MT組三者的峰值分別出現(xiàn)在00:30、10:18、08:30，較對照組相應(yīng)的峰值時間提前；NT組三者的峰值分別出現(xiàn)04:06、13:45、09:52，較對照組相應(yīng)的峰值時間也提前，但落后于MT組相應(yīng)的峰值時間。此外，MT組和NT組血漿PRA、AngⅡ的余弦擬合曲線振幅均高于對照組。心肌組織AngⅡ也呈現(xiàn)出典型的晝夜節(jié)律性，MC組、NC組、MT組、NT組的峰值時間分別出現(xiàn)在15:55、15:41、05:

9、16、05:53，曲線的振幅無明顯變化。 4.余弦擬合分析及零振幅檢驗顯示，四組大鼠心肌組織AT-1mRNA的表達也呈現(xiàn)出典型的晝夜節(jié)律性。MC組、NC組、MT組、NT組大鼠心肌組織中AT-1mRNA峰值的出現(xiàn)時間分別位于12:18、12:15、00:44、05:36，灌藥組的曲線振幅低于對照組。 5.方差分析顯示，灌藥組的血壓平均水平顯著低于對照組，而早晚灌藥組之間無差別。在02:00和20:00時MT組和NT組的血壓

10、明顯低于MC組和NC組，在08:00和14:00時各組間無差別。余弦擬合分析及零振幅檢驗顯示，MC組、NC組、MT組、NT組大鼠血壓均呈現(xiàn)出典型的晝夜節(jié)律性，峰值分別出現(xiàn)在20:40、21:10、19:28、20:05，且MT組和NT組的振幅均低于MC組和NC組。 結(jié)論： 1.氫氯噻嗪早晚不同時間喂藥大鼠血漿PRA和AngⅡ平均濃度顯著高于對照組，不同時間喂藥對血清ACE和心肌組織AngⅡ無顯著影響。提示，氫氯噻嗪能夠在

11、一定程度上激活RAS系統(tǒng)的部分成分。 2.四組大鼠血漿PRA、AngⅡ濃度，血清ACE活性及心肌組織AngⅡ濃度均具有明顯的晝夜節(jié)律性。不同時間灌服氫氯噻嗪能夠在一定程度上影響上述指標(biāo)的晝夜節(jié)律(主要表現(xiàn)為峰值相位的移動和振幅的改變)。早灌藥組較晚灌藥組對RAS系統(tǒng)各活性成分節(jié)律的提前作用明顯。 3.不同時間灌服氫氯噻嗪能下調(diào)心肌AT-1mRNA表達的平均水平。提示氫氯噻嗪在降壓的同時可能還有一定程度的心肌保護作用。四組

12、大鼠心肌AT-1mRNA表達存在晝夜節(jié)律性，不同時間灌服氫氯噻嗪可影響其心肌AT-1mRNA的晝夜節(jié)律表達，使其峰值提前，曲線振幅減低。 4.大鼠血壓具有明顯的晝夜節(jié)律性，呈晝低夜高型。早晚不同時間灌服氫氯噻嗪均能有效降低大鼠的平均血壓，尤其能明顯降低夜間血壓，而且還在一定程度上影響其血壓節(jié)律，使其峰值提前，振幅減低。 上述結(jié)果表明，大鼠血漿PRA、AngⅡ、ACE，心肌組織AngⅡ、AT-1mRNA以及血壓均具有明顯的