不同時間灌服氫氯噻嗪對大鼠血壓與內(nèi)皮源性血管活性物質(zhì)晝夜節(jié)律的影響.pdf

1、目的：血壓是血管內(nèi)流動的血液對單位面積血管壁的側(cè)壓力，是保證組織器官血液灌注，滿足機(jī)體代謝需要，進(jìn)而維持機(jī)體生命的前提。它受心臟每搏輸出量、心率、外周阻力等多種因素的影響，并且隨著這些因素的變化不斷波動。多數(shù)情況下，這種波動不是隨機(jī)的，而是呈現(xiàn)出一定的節(jié)律。因其節(jié)律周期大約為24小時，故稱之為晝夜節(jié)律(diurnalrhythm)或近日節(jié)律(circadian rhythm)。根據(jù)血壓的晝夜波動情況可將其分為四型：①杓型(dippers

2、)：即夜間血壓較日間下降10％～20％；②非杓型(non-dippers)：夜間血壓下降0％～10％；③超杓型或深杓型(over-dippers或extreme-dippers)：夜間下降＞20％；④反杓型(reverse-dippers、)：夜間血壓水平高于日間者。一般認(rèn)為，晝高夜低的杓型血壓對于人類是相對健康的。在高血壓患者、老年人、甚至部分健康人群中，其血壓的晝夜節(jié)律特征可能有所改變。眾所周知，隨著血壓水平的上升，靶器官損害及心腦

3、血管事件發(fā)生率顯著升高。但在血壓整體水平相似的情況下，當(dāng)其晝夜節(jié)律減弱或消失時，發(fā)生靶器官損害及心腦血管事件的危險性亦明顯增加。因此，在降壓治療的同時維持血壓杓型分布，對減少靶器官損害、降低心腦血管事件的發(fā)生率具有重要臨床意義。雖然積極有效的非藥物治療(如調(diào)整飲食結(jié)構(gòu)、減輕體重、改善生方式等)是降壓治療的基石，但目前血壓的控制仍主要依賴于降壓藥物。不同降壓機(jī)制與不同用藥時間均可能會影響藥物對血壓及其晝夜節(jié)律的調(diào)節(jié)。充分了解不同降壓藥物與

4、不同用藥時間對血壓晝夜節(jié)律的影響，有利于糾正異常的血壓節(jié)律，維持其正常節(jié)律。雖然目前關(guān)于血壓晝夜節(jié)律的形成機(jī)制尚不完全清楚，但國內(nèi)外部分學(xué)者已證實(shí)內(nèi)皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)等內(nèi)皮源性血管活性物質(zhì)的血漿濃度或活性存在典型的晝夜節(jié)律，并在調(diào)節(jié)血壓及其晝夜節(jié)律方面起著非常重要的作用。不同降壓藥物與不同用藥時間對內(nèi)皮源性血管活性物質(zhì)的時間生物學(xué)特征及血壓晝夜節(jié)律的影響尚有待深入探討。本研究以大鼠為實(shí)驗(yàn)對象進(jìn)

5、行了研究，旨在探討血壓及上述內(nèi)皮源性血管活性物質(zhì)的晝夜節(jié)律特征及氫氯噻嗪與不同用藥時間對其活性水平及晝夜節(jié)律的影響。 方法：清潔級健康雄性SD大鼠128只，10周齡，體重250-300克，隨機(jī)分為四大組：早07:00灌藥組(MT)，晚19:00灌藥組(NT)，早對照組(MC)和晚對照組(NC)。灌藥組給予氫氯噻嗪10mg/Kg/日，對照組分別于早07:00或晚19:00灌等體積安慰劑(蒸餾水)。每大組各32只。每大組又分4小組，

6、每小組各8只。按上述方案飼養(yǎng)喂藥4周后，分別于同日24小時內(nèi)不同時間點(diǎn)(02:00、08:00、14:00、20:00)用鼠尾測壓計(jì)測各組大鼠血壓并處死MT組、NT組、MC組、NC組中的各一小組大鼠。分別檢測大鼠血及心肌組織中NO、eNOS、ET-1的濃度或活性以及心肌組織eNOSmRNA的表達(dá)水平。應(yīng)用余弦擬合法分析四組實(shí)驗(yàn)動物血清及心肌組織中各指標(biāo)含量或活性的時間生物學(xué)特征，采用零振幅檢驗(yàn)(zeroamplitude test)評價

7、各檢測指標(biāo)的晝夜節(jié)律是否確實(shí)存在，應(yīng)用方差分析法比較各均值之間差異的顯著性，p＜0.05視為有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。 結(jié)果：1經(jīng)方差分析顯示，給藥組(MT組與NT組)血及心肌組織中NO含量、eNOS活性、心肌eNOSmRNA表達(dá)的平均水平均顯著高于對照組(MC組與NC組)(P＜0.05)，ET-1含量顯著低于對照組(P＜0.05)，而在MT組與NT組間及MC組與NC組間上述血管活性物質(zhì)水平無顯著差異(P＞0.05)。提示氫氯噻嗪可影

8、響正常大鼠的ET-1、NO、eNOS、eNOSmRNA表達(dá)。2對四組大鼠血及心肌ET-1、NO、eNOS、心肌eNOSmRNA結(jié)果應(yīng)用最小二乘法進(jìn)行余弦擬合，得出各自的擬合曲線及特征值。經(jīng)零振幅檢驗(yàn)示，血及心肌中各測量值均呈現(xiàn)典型的晝夜節(jié)律變化。MC組、NC組、MT組、NT組血心肌組織中ET-1峰值時間分別位于22:28、22:27、21:02、21:33與01:49、02:13、00:34、01:12，NO峰值時間分別位于10:40、

9、10:26、08:53、09:27與14:33、15:03、13:10、13:33，eNOS峰值時間分別位于07:51、08:40、05:56、06:40與12:37、12:26、09:45、10:23，心肌eNOSmRNA表達(dá)最高水平出現(xiàn)于11:35、11:54、08:37、08:58左右。與對照組相比，NO含量、eNOS活性、eNOSmRNA表達(dá)水平在給藥組的峰值及振幅較大，ET-1含量的峰值及振幅較小，上述各指標(biāo)的峰值出現(xiàn)時間均有

10、所提前。在MT組與NT組間及MC組與NC組間，上述各指標(biāo)的峰值、振幅、峰值時間均無明顯差異。提示氫氯噻嗪可影響正常大鼠上述各指標(biāo)的峰值及振幅，并可使其達(dá)峰時間提前，且與用藥時間無關(guān)。3方差分析顯示，給藥組血壓平均水平顯著低于對照組(P＜0.05)，而在MT組與NT組間及MC組與NC組間無顯著差異(P＞0.05)，提示不同用藥時間對氫氯噻嗪的降壓作用無顯著影響。4對MC、NC、MT、NT四組大鼠血壓結(jié)果應(yīng)用最小二乘法進(jìn)行余弦擬合，并經(jīng)零振

11、幅檢驗(yàn)示，四組大鼠血壓呈現(xiàn)典型的晝夜節(jié)律變化，其峰值出現(xiàn)在20:40、21:10、19:28、20:05。與對照組相比，給藥組峰值及振幅顯著降低，峰值出現(xiàn)時間有所提前，而在MC組與NC組間及MT組與NT組間上述指標(biāo)均無明顯差異。 結(jié)論：1四組大鼠血壓及血和(或)心肌組織中NO、eNOS、ET-1、eNOSmRNA水平均呈現(xiàn)典型的晝夜節(jié)律。2不同時間灌服氫氯噻嗪后，大鼠血壓及血和心肌組織中ET-1含量顯著降低，血、心肌組織中NO、