低聚果糖改善實驗性代謝綜合征大鼠的作用及其機制研究.pdf

1、一、研究背景:
　　 代謝綜合征(metabolicsyndrome，MS)是人類物質(zhì)不斷豐富、運動逐漸減少、壓力不斷增加的結果。隨著經(jīng)濟的發(fā)展，人們的飲食習慣、生活方式發(fā)生了巨大改變，MS患病率逐漸上升，且發(fā)病呈低齡化趨勢，兒童中已經(jīng)有MS的出現(xiàn)。MS對臨床預后至關重要，與發(fā)生2型糖尿病、冠心病、其他動脈粥樣硬化性血管病及多囊卵巢綜合征密切相關，可加速冠心病和其他動脈粥樣硬化性血管病的發(fā)生發(fā)展和死亡危險，MS已成為嚴重威脅我國

2、人民健康的公共衛(wèi)生問題。因此，深入研究MS的作用機制，治療措施，具有十分重要的社會和經(jīng)濟意義。
　　 近年來有關代謝綜合征的研究很多，大量研究已經(jīng)證實，代謝綜合征與不合理的飲食關系密切，高脂高糖飲食可誘導代謝綜合征的形成和加速疾病的進程。開發(fā)和研制具有預防和治療代謝綜合征的功能性食品具有重要的意義。
　　 低聚果糖(Fructo-oligosaccharide，F(xiàn)OS)作為益生元的一種，廣泛的存在于蔬菜、水果、谷物當中，

3、如韭菜、洋蔥、大蒜、香蕉、小麥、蜂蜜等。經(jīng)過多年的深入研究，世界上許多國家(包括中國)已確認低聚果糖具有調(diào)節(jié)血脂、降低血糖、改善腸道功能、防治便秘和腹瀉、提高人體免疫力等作用。但以往都是基于單病種的研究，而有關低聚果糖治療代謝綜合征的研究尚未見報道。
　　 本課題基于現(xiàn)今關于代謝綜合征的研究進展，用高脂高糖飼料制備符合臨床代謝綜合征特點大鼠模型，并進行為期4周的低聚果糖干預實驗研究，從代謝綜合征的整體觀察低聚果糖對改善代謝綜合征

4、大鼠肥胖、血脂紊亂、高血糖、胰島素抵抗等作用，觀察低聚果糖對代謝綜合征大鼠抗氧化作用、抑制炎癥反應作用，采用實時熒光定量PCR技術，研究低聚果糖對代謝綜合征大鼠visfatin的表達調(diào)控作用，及對腸-胰島軸GIP、GLP-1表達的影響。研究低聚果糖對實驗動物代謝綜合征的治療作用及作用機制，為開發(fā)具有預防和治療代謝綜合征的功能性保健食品提供實驗依據(jù)。
　　 二、研究內(nèi)容:
　　 (一)目的
　　 1.用高脂高糖飼料

5、制備代謝綜合征大鼠模型。
　　 2.研究低聚果糖對代謝綜合征大鼠的治療作用。
　　 3.研究低聚果糖治療代謝綜合征大鼠的作用機制。
　　 4.為低聚果糖預防和治療代謝綜合征提供科學的依據(jù)。
　　 (二)方法
　　 1.代謝綜合征大鼠模型的復制
　　 清潔級雄性健康Sprague-Dawley(SD)大鼠80只，體重(180g～210g)，實驗前為大鼠稱重，按體重隨機分為8組，每組10只，分

6、別為：空白對照前組(Pr-C)：進食普通飼料，空白對照后組(Po-C)，進食普通飼料，主要與模型后組進行比較，模型對照前組(Pr-M)，造模成功時檢測相關指標，主要與空白對照前組和模型對照后組進行比較，模型對照后組(Po-M)，造模成功后繼續(xù)給予高脂高糖飼料喂養(yǎng)，低聚果糖高劑量組(F-H)，低聚果糖中劑量組(F-M)，低聚果糖低劑量組(F-L)，西格列汀組(ST)。
　　 造模組和干預組均喂以高脂高糖飼料(10kg飼料含量：豬油

7、1.5kg、蔗糖2kg、膽固醇0.25kg、膽鹽0.03kg、食鹽0.5kg、添加劑0.2kg、其余4.7kg普通飼料)，對照組喂以普通飼料，大鼠自由進食，每天稱量飼料，每周稱量大鼠體重，造模0、4w、8w時監(jiān)測血糖、血脂情況，12w結束造模實驗，處理空白對照前組(Pr-C)和模型對照前組(Pr-M)，采集血清和肝腸組織等標本檢測指標。
　　 2.干預分組與方法
　　 低聚果糖高劑量(560mg/kg.d-1)、低聚果糖

8、中劑量組(280mg/kg.d-1)、低聚果糖低劑量組(140mg/kg.d-1)、藥物治療組：西格列汀配成0.1％濃度，按4mg/kg.d-1灌胃，低聚果糖干預各組用2.5％低聚果糖溶液按劑量灌胃，除正常對照后組喂以普通飼料，其余各組均仍喂以高脂高糖飼料，喂養(yǎng)4周，結束試驗。
　　 3.指標檢測
　　 (1)生化檢測：觀察低聚果糖對代謝綜合征大鼠體重、血糖、血脂改善作用。采用日本日立7600-020型全自動生化分析儀檢

9、測各組大鼠血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、空腹血糖(FBS)等指標。
　　 (2)抗氧化酶學指標：采用試劑盒檢測血清SOD、GSH-Px、MDA水平改變。
　　 (3)細胞因子檢測：免疫組化方法檢測大鼠血清TNF-α、IL-6、visfatin的改變。
　　 (4)表達調(diào)控檢測：采用實時熒光定量PCR技術檢測低聚果糖對代謝綜合征大鼠脂肪組

10、織visfatinmRNA，以及腸道組織GLP-1及GIP基因表達的影響。
　　 4、數(shù)據(jù)處理
　　 計量資料以(x-±s)表示，多組間均數(shù)比較采用LSD單因素方差分析，計數(shù)資料采用非參統(tǒng)計分析H檢驗。采用SPSS15.0軟件包進行統(tǒng)計分析。
　　 三、結果:
　　 1.動物實驗干預研究
　　 (1)成功的用高脂高糖飼料制備與臨床代謝綜合征相似大鼠模型。
　　 (2)低聚果糖可以改善代謝綜

11、合征大鼠糖脂代謝及抗氧化應激等指標。
　　 2.低聚果糖治療代謝綜合征機制研究
　　 (1)低聚果糖能夠降低血清IL-6、TNF-α含量。
　　 (2)低聚果糖可抑制visfatinmRNA在內(nèi)臟脂肪中的表達，而降低血清visfatin水平。
　　 (3)低聚果糖可以增加腸道細胞GLP-1mRNA表達，而對GIPmRNA表達水平無影響。
　　 四、結論:
　　 1、成功地用高脂高糖飼料制備