鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞以及其親本細胞的細胞周期分布.pdf

1、腫瘤化療藥物抵抗的分子機制十分復雜，目前歸納為基因突變-藥物抵抗假說和染色體不平衡-藥物抵抗假說。目前，鼻咽癌化療藥物抵抗過程中，其細胞周期改變及細胞周期調(diào)控因子機制尚不清楚，深入研究十分重要，對指導鼻咽癌的治療有重要價值。
　　 目的：探討鼻咽癌親本細胞系及耐藥細胞系細胞周期改變及細胞周期調(diào)控因子變化情況，了解細胞周期改變及細胞周期調(diào)控因子與鼻咽癌化療耐藥發(fā)生發(fā)展中的關系；試圖發(fā)現(xiàn)細胞周期改變及細胞周期調(diào)控因子在鼻咽癌化療耐藥

2、過程中的作用。
　　 方法：
　　 1．以鼻咽癌細胞CNE-1,HNE2,5-8F及被誘導產(chǎn)生的紫杉醇耐藥細胞CNE-1/Taxol,HNE-2/Taxol,5-8F/Taxol為研究對象，用集落形成實驗檢測所有細胞系的生長抑制率，并計算其紫杉醇和順鉑半數(shù)抑制劑量(IC50)。
　　 2．流式細胞儀檢測不同濃度的紫杉醇(0 ng/ml、5 ng/ml、10 ng/ml、15 ng/ml、20 ng/ml、25 n

3、g/ml)和順鉑(0 ng/ml、100 ng/ml、200 ng/ml、300 ng/ml、400 ng/ml、500 ng/ml)處理鼻咽癌親本細胞系及紫杉醇耐藥細胞系后細胞周期分布情況。
　　 3．熒光定量PCR檢測鼻咽癌親本細胞系和紫杉醇耐藥系細胞周期蛋白依賴性激酶CDK1和有絲分裂紡錘體檢控點基因BubR1的表達。
　　 結果：
　　 1．CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol、5-8F/Tax

4、ol紫杉醇的IC50值分別為9.61±0.43、11.48±0.52、9.96±0.48ng/ml,相應親本細胞的IC50值分別為1.14±0.05、1.78±0.08、1.63±0.06ng/ml,其耐藥指數(shù)分別為8.43±0.42、6.45±0.31、6.11±0.35；順鉑作用于鼻咽癌親本細胞CNE-1、HNE-2、5-8F的IC50值分別為：380.83±16.42ng/ml、362.12±15.31ng/ml、316.82±1

5、4.65ng/ml,作用于耐藥細胞CNE-l/Taxol、HNE-2/Taxol、5-8F/Taxol的IC50值分別為177.43±7.65ng/ml、69.94±3.53ng/ml、147.91±6.53ng/ml。
　　 2．10ng/ml紫杉醇處理鼻咽癌親本細胞系(CNE-1,HNE-2)出現(xiàn)G2/M期阻滯，并隨濃度增加G2/M期阻滯逐漸增加；15ng/ml紫杉醇處理鼻咽癌耐藥細胞系(CNE-l/Taxol,HNE-2/

6、Taxol)才引起G2/M期阻滯，并隨濃度增加G2/M期逐漸增加；相同濃度紫杉醇引起鼻咽癌親本細胞G2/M阻滯明顯高于鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞系(p＜0.05)；順鉑可以導致鼻咽癌親本細胞系及耐藥細胞系細胞周期S期明顯增加，相同濃度順鉑處理時，鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞系S期分布明顯高于親本細胞系(p＜0.05)。
　　 3．鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞(HNE-2/Taxol)中細胞周期蛋白依賴性激酶CDK1表達比在親本細胞(HNE-2)中上調(diào)