龜鹿益神配方顆粒對(duì)慢性疲勞大鼠行為和骨骼肌線粒體的影響.pdf

1、目的：建立慢性疲勞大鼠模型，觀察龜鹿益神配方顆粒對(duì)慢性疲勞大鼠一般情況和行為學(xué)指標(biāo)（力竭游泳時(shí)間、鼠尾懸吊靜止時(shí)間）的影響，電鏡下觀察慢性疲勞大鼠骨骼肌線粒體微觀結(jié)構(gòu)的變化，檢測(cè)血清琥珀酸脫氫酶活性的變化，探討慢性疲勞綜合征的發(fā)病機(jī)理；觀察龜鹿益神配方顆粒對(duì)慢性疲勞大鼠骨骼肌線粒體微觀結(jié)構(gòu)和血清SDH的影響，探討其作用機(jī)制，為龜鹿益神配方顆粒治療CFS的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論支持。
　　方法：雄性SPF級(jí)SD大鼠40只，體重2

2、00±20克，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)抽取16只不進(jìn)行造模，其余24只進(jìn)行造模。采用強(qiáng)制力竭游泳，束縛和夾尾復(fù)合因素刺激，構(gòu)建慢性疲勞大鼠模型。造模成功后，未造模者隨機(jī)分為兩組，分別為正常組和正常對(duì)照組；造模者隨機(jī)分為3組，分別為模型組、蓯蓉益腎組、龜鹿益神組。從造模結(jié)束次日起，在正常飼養(yǎng)的基礎(chǔ)上，正常組、模型組給予生理鹽水灌胃；正常對(duì)照組、龜鹿益神組給予龜鹿益神配方顆?；鞈乙汗辔?；蓯蓉益腎組給予蓯蓉益腎顆?；鞈乙汗辔?。各組大鼠均給藥1次

3、/d，連續(xù)14天。造模前、造模后及末次給藥后均測(cè)一次大鼠體重、力竭游泳時(shí)間及鼠尾懸吊靜止時(shí)間。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，大鼠經(jīng)腹腔麻醉后，取各組大鼠右后肢骨骼肌組織一塊，電鏡下觀察線粒體結(jié)構(gòu)。經(jīng)腹主動(dòng)脈采血分離上清液，采用ELISA法測(cè)定各組大鼠血清SDH活性。采用IBM SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。
　　結(jié)果：
　?。?）造模結(jié)束后，各組造模大鼠體重增長(zhǎng)緩慢甚至減輕，飲食量、飲水量減少，瞇眼懶動(dòng)，便溏，毛發(fā)暗淡失去光澤。

4、與正常組比較，正常對(duì)照組體重、力竭游泳時(shí)間、鼠尾懸吊靜止時(shí)間無(wú)顯著性差異；模型組、龜鹿益神組、蓯蓉益腎組大鼠體重減輕、力竭游泳時(shí)間縮短、鼠尾懸吊靜止時(shí)間延長(zhǎng)均有顯著性差異。給藥結(jié)束后，與正常組相比，正常對(duì)照組力竭游泳時(shí)間延長(zhǎng)有顯著性差異，龜鹿益神組無(wú)顯著性差異，兩組大鼠體重、鼠尾懸吊靜止時(shí)間均無(wú)顯著性差異；蓯蓉益腎組體重減輕有顯著性差異，力竭游泳時(shí)間和鼠尾懸吊靜止時(shí)間均縮短無(wú)顯著性差異；模型組大鼠體重減輕、力竭游泳時(shí)間變短、鼠尾懸吊靜止

5、時(shí)間延長(zhǎng)均有顯著性差異。與模型組相比，龜鹿益神組、蓯蓉益腎組大鼠體重明顯增加、力竭游泳時(shí)間明顯延長(zhǎng)、鼠尾懸吊靜止時(shí)間縮短均有顯著性差異。與蓯蓉益腎組相比，龜鹿益神組大鼠體重增加、鼠尾懸吊靜止時(shí)間縮短均無(wú)顯著性差異，力竭游泳時(shí)間延長(zhǎng)有顯著性差異。
　?。?）模型組大鼠骨骼肌肌原纖維排列紊亂，Z線、M線模糊且排列紊亂，線粒體形狀不規(guī)則，體積較正常組明顯偏小，多數(shù)線粒體出現(xiàn)空泡，膜溶解并相互連接。與模型組相比，龜鹿益神組和蓯蓉益腎組大鼠

6、骨骼肌肌原纖維排列較整齊，Z線、M線清晰且整齊，線粒體體積大，空泡樣變少。與正常組對(duì)比，正常對(duì)照組大鼠骨骼肌排列更整齊，Z線、M線清晰且排列更有規(guī)則，線粒體結(jié)構(gòu)更完整，且體積大。
　?。?）與正常組相比，正常對(duì)照組血清SDH活性明顯降低，有顯著差異；龜鹿益神組大鼠血清SDH活性輕度升高，無(wú)顯著性差異；蓯蓉益腎組、模型組大鼠血清SDH活性升高，有顯著性差異。與模型組比較，蓯蓉益腎組、龜鹿益神組血清SDH活性降低，有顯著性差異。與蓯蓉

7、益腎組相比，龜鹿益神組血清SDH活性降低，有顯著性差異。
　　結(jié)論：
　?。?）本實(shí)驗(yàn)采用非病毒感染的慢性應(yīng)激刺激方法，即強(qiáng)制力竭游泳，束縛和夾尾激怒的復(fù)合因素刺激，構(gòu)建慢性疲勞大鼠模型。此方法操作性強(qiáng)，能夠模擬導(dǎo)致人類(lèi)疲勞的內(nèi)外環(huán)境，可復(fù)制出人體的慢性疲勞狀態(tài)。
　?。?）龜鹿益神配方顆?？梢匝娱L(zhǎng)慢性疲勞大鼠力竭游泳時(shí)間，縮短鼠尾懸吊靜止時(shí)間，保護(hù)線立體結(jié)構(gòu)的完整性，降低血清 SDH的活性。
　?。?）本實(shí)驗(yàn)表

8、明，慢性疲勞大鼠骨骼肌及其線粒體結(jié)構(gòu)易損傷，且不易恢復(fù)，血清SDH活性明顯升高。龜鹿益神配方顆?？稍鰪?qiáng)骨骼肌及其線粒體膜的穩(wěn)定性，促進(jìn)其損傷的恢復(fù)，增強(qiáng)線粒體功能，降低血清SDH活性。提示龜鹿益神配方顆?？赏ㄟ^(guò)保護(hù)線粒體結(jié)構(gòu)、增強(qiáng)其功能從而達(dá)到抗疲勞的作用，進(jìn)一步闡釋了慢性疲勞綜合征的發(fā)病機(jī)制及龜鹿益神配方顆粒治療該病的作用機(jī)理，為臨床應(yīng)用龜鹿益神配方顆粒治療慢性疲勞綜合征提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　?。?）龜鹿益神配方顆?？勺鳛镃FS的