開(kāi)心散抗抑郁的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制研究.pdf

1、開(kāi)心散是一首治療中醫(yī)情志病的基本方，由人參、茯苓、遠(yuǎn)志、石菖蒲四味藥組成。古代醫(yī)書(shū)多有收載，主治均為中醫(yī)情志性疾病，類(lèi)似于西醫(yī)的抑郁癥。臨床應(yīng)用此方(或加減)治療精神性疾病如抑郁、焦慮等癥，效果確切。為尋找開(kāi)心散抗抑郁作用的最佳配伍組成及有效物質(zhì)基礎(chǔ)，明確其抗抑郁作用的機(jī)制，本文通過(guò)化學(xué)和藥理學(xué)相結(jié)合的方法，對(duì)開(kāi)心散進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。 以小鼠強(qiáng)迫性游泳和懸尾為模型，通過(guò)分煎提取后成分組合和合煎提取兩種工藝，對(duì)《千金要方》、《古今

2、錄驗(yàn)》、《太平惠民和劑局方》所載的開(kāi)心散進(jìn)行了抗抑郁作用的對(duì)比篩選研究。結(jié)果表明，《太平惠民和劑局方》收載的人參、茯苓各三兩，遠(yuǎn)志、石菖蒲各二兩的開(kāi)心散處方配比可顯著減少小鼠強(qiáng)迫游泳和懸尾的不動(dòng)時(shí)間，與《千金要方》、《古今錄驗(yàn)》收載的開(kāi)心散類(lèi)方相比，具有最佳的抗抑郁作用。而且，開(kāi)心散合煎提取的抗抑郁作用明顯優(yōu)于各個(gè)藥物單煎后成分組合的作用效果。 在篩選基礎(chǔ)上，采用大鼠強(qiáng)迫游泳和5-HTP誘導(dǎo)小鼠甩頭行為模型對(duì)《太平惠民和劑局方》

3、開(kāi)心散進(jìn)行藥效評(píng)價(jià)，結(jié)果表明，《太平惠民和劑局方》開(kāi)心散可顯著減少大鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間，明顯增強(qiáng)5-HTP誘導(dǎo)的小鼠甩頭行為。在小鼠強(qiáng)迫游泳模型上，觀察給予《太平惠民和劑局方》收載的開(kāi)心散不同時(shí)間強(qiáng)迫游泳模型小鼠中樞神經(jīng)遞質(zhì)和血漿皮質(zhì)醇(GC)含量的變化，結(jié)果顯示，開(kāi)心散能顯著降低強(qiáng)迫性游泳小鼠血漿GC含量，提高腦內(nèi)5-HT和NE含量，降低5-HT/5-HIAA的比值，但對(duì)強(qiáng)迫游泳模型小鼠腦內(nèi)DA含量無(wú)顯著性影響。 采用溶劑提取

4、，大孔吸附樹(shù)脂吸附，水及梯度乙醇洗脫，結(jié)合小鼠強(qiáng)迫性游泳和懸尾模型，篩選了開(kāi)心散抗抑郁的有效活性部位，證明開(kāi)心散50％乙醇提取，30％～60％乙醇洗脫部分是開(kāi)心散抗抑郁作用的活性部位。薄層層析(TLC)和高效液相(HPLC)色譜分析表明，該部分主要包括人參和遠(yuǎn)志中的成分。翻轉(zhuǎn)腸囊模型結(jié)合液相質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC-MS)技術(shù)研究表明，開(kāi)心散有效部位中吸收入腸的主要成分包括人參皂苷Rb1、Rb2、Rg1、Rg2、Rc、Rf、Ro、N-R2和遠(yuǎn)

5、志中的阿魏酰蔗糖、芥子酰蔗糖、三甲氧基肉桂酰蔗糖、雙芥子酰基蔗糖、對(duì)羥基苯甲酰三甲氧基肉桂酰蔗糖、芥子酰三甲氧基肉桂酰蔗糖等。 采用大鼠CUMS結(jié)合孤養(yǎng)模型，觀察開(kāi)心散活性部位對(duì)抑郁模型大鼠行為學(xué)、海馬超微結(jié)構(gòu)及海馬P-CREB、BDNF表達(dá)的影響，結(jié)果表明，開(kāi)心散活性部位能促進(jìn)慢性應(yīng)激模型大鼠體重增加和糖水?dāng)z入，顯著提高應(yīng)激大鼠水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng)得分，改善抑郁模型大鼠的抑郁癥狀；能夠減輕應(yīng)激造成的大鼠海馬CA3區(qū)錐體神經(jīng)元損傷

6、；增加應(yīng)激大鼠海馬各區(qū)p-CREB和BDNF表達(dá)。 采用Morris水迷宮的方法，研究了開(kāi)心散活性部位對(duì)慢性應(yīng)激所致的學(xué)習(xí)記憶障礙模型小鼠的影響，表明開(kāi)心散活性部位對(duì)慢性應(yīng)激所致的小鼠學(xué)習(xí)記憶和空間障礙有明顯改善的作用。 本研究結(jié)果表明，《太平惠民和劑局方》收載的開(kāi)心散以人參皂苷、遠(yuǎn)志寡糖酯和石菖蒲揮發(fā)油為主要活性成分，通過(guò)降低血漿GC含量，提高腦內(nèi)5-HT和NE含量，增加海馬各區(qū)p-CREB和BDNF表達(dá)，加強(qiáng)神經(jīng)元營(yíng)