一株產(chǎn)黃色素紅曲霉Monascus HB-5的發(fā)酵條件及色素穩(wěn)定性、安全性研究.pdf

1、實(shí)驗(yàn)室從紅曲霉(Monascus HB-2)中分離到一株單產(chǎn)黃色素紅曲霉：Monascus HB-5。其生物學(xué)特性表現(xiàn)為：氣生菌絲發(fā)達(dá)，在平血PDA培養(yǎng)基上呈中間黃色，邊緣白色的圓形隆起。該菌無(wú)性繁殖產(chǎn)生分生孢子，卵形或梨形，鏈狀或單個(gè)生于菌絲體的頂端或分支，大小為(4～10)×(5～12)μm；有性繁殖形成球形子囊果，大小為(15～19)×(20～24)μm，子囊果內(nèi)生子囊孢子，大小為(3～5)×(2～4)μm。 對(duì)該菌的發(fā)酵

2、條件進(jìn)行了初步探討，發(fā)現(xiàn)其生長(zhǎng)的最適pH為4.0～5.0，最適溫度為30～32℃，適合的碳源為玉米粉，氮源為硝酸胺。該菌的發(fā)酵產(chǎn)物二_黃色素的色調(diào)為黃色，僅在370nm處存在最大吸收峰。該菌液體發(fā)酵的最適條件為：接種量為10％，pH為4.6～5.7，對(duì)培養(yǎng)基成分進(jìn)行了正交優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：發(fā)酵的最優(yōu)培養(yǎng)基組合為玉米粉：10％，硝酸胺：0.2％，磷酸二氫鉀：0.2％，硫酸鎂：0.08％。各因素中，玉米粉(碳源)的R值最大，說(shuō)明它對(duì)產(chǎn)

3、色素的影響最大，硫酸鎂次之。采用以上配方多次補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)，搖瓶發(fā)酵結(jié)果均表明此配方可行。搖瓶色價(jià)基本穩(wěn)定在200u／ml左右。對(duì)該菌的固體發(fā)酵條件作了初步研究，其固體發(fā)酵最適條件為：以秈米作為發(fā)酵底物，初始含水量為50％，并在培養(yǎng)過(guò)程中12、36，48h時(shí)分三次添加6％的無(wú)菌水，另外添加蛋白胨3％，玉米粉3％，酵母膏1％對(duì)產(chǎn)色素有明顯的促進(jìn)作用，最終發(fā)酵產(chǎn)物色價(jià)可達(dá)1032u/g。 以兩種天然食用色素(梔子黃、紅曲紅)作為對(duì)照對(duì)該菌

4、產(chǎn)生黃色素的穩(wěn)定性做了初步研究，研究表明紅曲黃無(wú)論在光穩(wěn)定性還是熱穩(wěn)定性上均略優(yōu)于梔子黃色素和紅曲紅色素，并且對(duì)添加劑十分穩(wěn)定。 對(duì)紅曲中citrinin檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)室經(jīng)雙向薄層TLC法檢測(cè)，以氯仿：甲醇：乙酸(65:25:1)為第一相縱向展開(kāi)，以苯:乙酸乙酯:甲酸(6:3:1)為第二相展開(kāi)劑側(cè)向展開(kāi)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明紅曲黃色素發(fā)酵液中citrinin的含量小于0.1mg/L(最小檢出限:0.4μg)。小鼠經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)通過(guò)小