前扣帶回皮質(zhì)對內(nèi)臟高敏感大鼠內(nèi)臟痛的易化調(diào)節(jié)作用.pdf

1、背景：內(nèi)臟高敏感是包括腸易激綜合征(IBS)在內(nèi)的功能性胃腸道疾病重要的發(fā)病機(jī)制。功能性腦顯像研究發(fā)現(xiàn)，直腸擴(kuò)張引起的前扣帶回皮質(zhì)（ACC）的興奮性在IBS 患者更高。ACC 是一個(gè)參與痛情緒反應(yīng)的邊緣系統(tǒng)核團(tuán)。本系列的前期研究已在ACC 內(nèi)檢測到對結(jié)直腸擴(kuò)張（CRD）起反應(yīng)的神經(jīng)元，而且證實(shí)ACC 在內(nèi)臟高敏感大鼠中被致敏。但ACC 的致敏對于內(nèi)臟高敏感的意義卻尚未明確。 目的：探索ACC 神經(jīng)元的激活是否在內(nèi)臟高敏感大鼠增強(qiáng)

2、內(nèi)臟痛反應(yīng)，以及參與此易化作用的谷氨酸受體的類別。 方法：本研究記錄CRD 引起的內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)反射（VMR)作為評估內(nèi)臟痛反應(yīng)的指標(biāo)。觀察正常大鼠中，電刺激及谷氨酸鈉微量注射活化ACC 對內(nèi)臟痛反應(yīng)和傷害性CRD 誘導(dǎo)的脊髓背角神經(jīng)元Fos 表達(dá)的影響。采用雞卵清蛋白腹腔注射和灌腸結(jié)合CRD 建立IBS 大鼠模型，觀察吻側(cè)和尾側(cè)ACC 毀損、谷氨酸鈉和谷氨酸受體拮抗劑（NMDA 受體拮抗劑AP5 和非NMDA 受體拮抗劑DNQX）微

3、量注射在正常大鼠和IBS 大鼠對等級CRD 誘導(dǎo)的VMR 的影響。以Western 免疫印跡法檢測正常大鼠和IBS 大鼠ACC 內(nèi)NMDA 受體亞基的蛋白表達(dá)，并以電穿孔法將針對NR2B 亞基的siRNA 轉(zhuǎn)導(dǎo)入吻側(cè)ACC 后觀察其對正常大鼠和IBS 大鼠內(nèi)臟痛感知的影響。 結(jié)果：電刺激和谷氨酸鈉微量注射入吻側(cè)ACC 可顯著增強(qiáng)正常大鼠等級CRD 誘導(dǎo)的VMR，且高劑量谷氨酸鈉吻側(cè)ACC 內(nèi)微量注射可顯著增強(qiáng)傷害性CRD 誘導(dǎo)的

4、腰骶段脊髓背角神經(jīng)元Fos 蛋白的表達(dá)。建立的IBS大鼠模型對等級CRD 誘導(dǎo)的VMR 反應(yīng)明顯增強(qiáng)，表明結(jié)腸痛覺過敏的形成。IBS 大鼠對谷氨酸鈉ACC 內(nèi)微量注射的反應(yīng)較正常大鼠增強(qiáng)，在正常大鼠無作用的2mM 谷氨酸鈉可顯著增強(qiáng)IBS 大鼠的內(nèi)臟痛反應(yīng)，表明IBS 大鼠的ACC 被致敏。吻側(cè)或尾側(cè)ACC 毀損和谷氨酸受體拮抗劑對正常大鼠的內(nèi)臟痛反應(yīng)均無影響。而藥物毀損IBS 大鼠吻側(cè)ACC 后20、40和60 mmHg CRD 誘導(dǎo)

5、的VMR 較毀損前減少了約63.2％、34.1％和26.8％，NMDA 受體拮抗劑（200 mM AP5）則分別抑制了50.1％、21.4％和20.0％。 IBS 大鼠吻側(cè)ACC 內(nèi)NMDA 受體NR2B 亞基的表達(dá)較正常大鼠顯著上調(diào)，以針對NR2B 的siRNA 下調(diào)NR2B 表達(dá)后可顯著抑制IBS 大鼠中等級CRD誘導(dǎo)的VMR ，但對正常大鼠無作用。 結(jié)論：吻側(cè)ACC 被激活后可通過下行易化調(diào)節(jié)脊髓傷害性信息的傳遞而