環(huán)磷酰胺與細胞毒性T細胞聯(lián)合免疫治療B16黑色素腫瘤.pdf

1、黑色素瘤是一種來源于黑色素細胞的惡性皮膚癌癥，其具有發(fā)病率低，致死率高等特點。目前，臨床上主要還是通過化療和放療治療黑色素瘤。近年來有多種免疫療法引入黑素瘤治療，包括疫苗療法、過繼回輸 T細胞療法、細胞因子與靶標藥物療法等等。其中過繼回輸T細胞療法治療黑色素瘤已在臨床上得到應用，過繼回輸T細胞療法是指從腫瘤組織中獲取腫瘤浸潤淋巴細胞，然后將細胞回輸?shù)讲∪梭w內(nèi)進行治療。但是這種獲得細胞的方法成本較高，迫切需要一種合適的的能夠在體外獲得大量

2、的腫瘤特異性的細胞毒性T淋巴細胞的方法。在腫瘤微環(huán)境中存在大量的具有免疫抑制性的細胞與細胞因子，它們會抑制體外回輸?shù)募毎拘訲細胞使其無法進入腫瘤中發(fā)揮治療作用，導致單純的細胞回輸治療腫瘤效果不明顯。需要將免疫療法與化療方法相結(jié)合，在回輸細胞前先用化療藥物降低腫瘤微環(huán)境的免疫抑制作用，從而增強治療黑色素瘤的效果。
　　本課題是使用B16腫瘤細胞裂解液作為抗原，在體外通過低劑量的細胞因子IL-2與腫瘤細胞裂解抗原刺激脾臟細胞激活，使

3、用該方法在體外培養(yǎng)脾臟細胞4-5天，即可以獲得由脾臟細胞增殖來的大量具有腫瘤特異性殺傷效應的細胞毒性 T細胞。通過流式細胞術(shù)檢測激活的T細胞對腫瘤細胞的殺傷效率，發(fā)現(xiàn)當效靶細胞比例50:1的時候，殺傷效率就可以達到60％。同時對脾臟細胞具有較低的殺傷效率，證明這種方法獲得激活的T細胞具有很好的腫瘤特異性殺傷效應。
　　將體外激活的T細胞與環(huán)磷酰胺化療藥物聯(lián)合治療黑色素瘤，低劑量的環(huán)磷酰胺可以剔除免疫抑制性調(diào)節(jié)性T細胞，本課題選用1