雷公藤內酯醇洗脫支架預防冠脈支架內再狹窄的實驗研究.pdf

1、研究目的:冠狀動脈支架植入術抵消了血管的彈性回縮和負性重塑，使再狹窄率下降為15～60％，但是支架內的新生內膜(neointima,NI)增生程度反而加重。如何防治支架內再狹窄(in-stentstenosis,ISR)是當前介入性心臟病學所面臨的主要問題之一。使用藥物洗脫支架(drugelutingstent,DES)的方法，預防了ISR的發(fā)生，是介入性心臟病學的一個重大進展。本研究的目的是通過建立豬的冠狀動脈ISR模型，探討國產雷公

2、藤內酯醇洗脫支架預防ISR形成的有效性和安全性，及初步探討其作用機理，為國產藥物支架的進一步研制和臨床應用提供實驗依據(jù)。 方法一、實驗動物 20只國內雜種幼豬，按完全隨機的方法分為不銹鋼裸支架組和雷公藤內酯醇洗脫支架組各10只，設置術后28天為觀察終點。 二、動物模型的建立 (1)支架植入： 豬全身麻醉后，切開右腹股溝皮膚、皮下組織，穿刺右股動脈，行冠狀動脈造影及支架植入術。先使用造影導管行選擇性

3、冠狀動脈造影，選取近段無重要分支血管為支架植入部位。將超軟導絲送至靶血管遠端，以指引導管作為參考，用帶支架球囊以球囊/血管1.1:1的比例，用10～15個大氣壓、20秒擴張釋放支架。支架釋放后再行選擇性冠狀動脈造影。 (2)動物喂養(yǎng)： 支架植入前1天予阿司匹林300mg，氯吡格雷75mg口服。術后予阿司匹林150mg/天、氯吡格雷37.5mg/天口服。普通飼料喂養(yǎng)至隨訪期結束。 三、評價方法和指標 1)選

4、擇性冠狀動脈造影： 兩組實驗動物予支架植入后28天行冠狀動脈造影，采用造影機電腦自帶軟件(QCA)測定鄰近正常血管直徑、管腔最小直徑和計算狹窄程度。 2)病理組織形態(tài)檢查： 支架段血管切片，測定血管外彈力膜面積、內彈力膜面積、血管腔面積和新生內膜面積及進行血管損傷程度評分。 3)免疫組織化學檢測： S-P法檢測兩組血管新生內膜的增殖細胞核抗原(PCNA)、血小板源性生長因子(PDGF)和P27ki

5、p1基因表達情況。每個切片任取5個高倍視野(×400)計數(shù)陽性細胞數(shù)，將陽性細胞數(shù)累計后取平均值作為每只動物的陽性細胞數(shù)。 4)安全性監(jiān)測： 支架植入前及隨訪期結束冠狀動脈造影前取外周血檢測全血細胞計數(shù)、血清谷丙轉氨酶(ALT)、γ-谷氨酰轉肽酶(GGT)、肌酐(Cr)；實驗動物處死后檢查重要臟器的大體形態(tài)并送組織病理學檢查，檢測其安全性。 結果 1、冠狀動脈造影定量分析： 28天復查時，支架內最

6、小直徑裸支架組明顯小于雷公藤內酯醇組(P＜0.05)，支架內狹窄程度裸支架組大于雷公藤內酯醇組(P＜0.05)，差異有顯著性(P＜0.05)。 2、病理形態(tài)學檢查結果： 支架植入后28天，雷公藤內酯醇組血管腔面積比裸支架組明顯大(P＜0.05)。新生內膜面積和狹窄程度，雷公藤內酯醇組比裸支架組顯著減小，差異有顯著性(P＜0.05)。 3、免疫組織化學檢測： 支架植入后28天兩組血管新生內膜均可見增殖細胞(

7、PCNA陽性細胞)，雷公藤內酯醇組比裸支架組明顯減少；PDGF陽性細胞數(shù)雷公藤內酯醇組少于裸支架組；P27kip1陽性細胞數(shù)在雷公藤內酯醇組比裸支架組增多，差異均有顯著性(P＜0.05)。 4、安全性監(jiān)測： 實驗動物術前、術后28天外周血細胞計數(shù)、ALT、GGT及Cr未見明顯改變(P＞0.05)。實驗動物處死后，檢查重要臟器的大體形態(tài)，并送組織病理學檢查證實無重要臟器的炎癥反應和壞死。 結論 1、雷公藤內