TRAIL及其受體在大腸癌的表達研究.pdf

1、本研究擬采用免疫組化鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶法(SP法)和流式細胞分析方法檢測大腸癌組織和正常組織中腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TNF-relatedapoptosisinducingligand，TRAIL)、DR4和DR5的表達情況，分析其表達與大腸癌生物學行為之間的關系，從而為大腸癌治療提供依據。 研究方法： 1.病例：選取河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院2003年1月～2004年8月外科手術切除并經病理診斷確診的大腸

2、癌標本41例。按照2000年WHO新的大腸腫瘤組織學分級標準分類，高分化腺癌(Ⅰ級)10例，中度分化腺癌(Ⅱ級)15例，低分化腺癌(Ⅲ級)16例。有淋巴結轉移者22例，無淋巴結轉移者19例。另取9例癌旁組織，經病理證實為正常大腸粘膜的組織作為對照。 2.免疫組化染色及結果判定：采用免疫組化SP法對大腸癌和癌旁正常組織中TRAIL、DR4和DR5的表達進行研究。三者表達定位于細胞膜和細胞漿，陽性信號呈棕黃色顆粒狀。根據染色深淺分為

3、三個等級，分別記分1，2，3。再根據染色范圍記分1，2，3。兩項記分相加，＜3分為陰性表達，≥3分為陽性表達。分別計算大腸癌組織和正常組織的陽性表達率。 3.流式細胞分析。石蠟切片，利用網搓法進行單細胞懸液制備。熒光標記細胞后，采用美國BeckmanCoulter公司生產的Epics-XLⅡ型流式細胞儀上機檢測，應用Expo32ADC進行免疫熒光數據分析。以熒光指數(FI)表示蛋白表達的相對含量。 4.統計學處理：應用S

4、PSS11.0統計軟件包對實驗結果進行x2檢驗、t檢驗、直線相關分析。 研究結果： 1.TRAIL蛋白免疫組化染色定位于細胞膜和細胞漿，癌組織中陽性表達率為24.4％，在正常組織中陽性表達率為66.7％，流式細胞分析該蛋白表達量，癌組織平均熒光指數為0.92±0.09，正常組織平均熒光指數為1.05±0.12。癌組織中TRAIL蛋白在免疫組化中的陽性表達率和流式細胞分析的蛋白表達量均低于正常組織(P＜0.05)。癌組織中

5、，TRAIL蛋白表達隨著分化程度的降低呈逐步下降趨勢(P＜0.05)；在淋巴結轉移組的表達和無淋巴結轉移組的表達無統計學差異(P＞0.05)。 2.DR4蛋白免疫組化染色定位于細胞膜和細胞漿，癌組織中陽性表達率為65.85％，在正常組織中陽性表達率為22.2％，流式細胞分析該蛋白表達量，癌組織平均熒光指數為1.17±0.11，正常組織平均熒光指數為1.00±0.13。癌組織中DR4蛋白在免疫組化中的陽性表達率和流式細胞分析的蛋白

6、表達量均高于正常組織(P＜0.05)。癌組織中，DR4蛋白表達與分化程度的高低無統計學差異(P＞0.05)；在淋巴結轉移組的表達和無淋巴結轉移組表達無統計學差異(P＞0.05)。 3.DR5蛋白免疫組化染色定位于細胞膜和細胞漿，癌組織中陽性表達率為73.17％，在正常組織中陽性表達率為22.2％，流式細胞分析該蛋白表達量，癌組織平均熒光指數為1.12±0.12，正常組織平均熒光指數為0.98±0.12。癌組織中DR5蛋白在免疫組

7、化中的陽性表達率和流式細胞分析的蛋白表達量均高于正常組織(P＜0.05)。癌組織中，DR5蛋白表達與分化程度無統計學差異(P＞0.05)；在淋巴結轉移組的表達明顯高于無淋巴結轉移組(P＜0.05)。 4.TRAIL與DR4蛋白表達量進行直線相關分析，r=0.33，P＞0.05。 5.TRAIL與DR5蛋白表達量進行直線相關分析，r=0.05，P＞0.05。6DR4與DR5蛋白表達量進行直線相關分析，r=0.49，P＞0.

8、05。 研究結論： 1.TRAIL在正常組織的表達明顯高于大腸癌組織，在不同組織學分級的癌組織中TRAIL蛋白的表達有統計學差異，淋巴結轉移與否的癌組織中TRAIL的表達無統計學差異。 2.DR4在大腸癌組織的表達明顯高于正常組織，在不同組織學分級的癌組織中DR4蛋白的表達無統計學差異，淋巴結轉移與否的癌組織中DR4的表達亦無統計學差異。 3.DR5在大腸癌組織的表達明顯高于正常組織，在不同組織學分級的癌