白藜蘆醇改善大鼠非酒精性脂肪肝的機制研究.pdf

1、非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)是指由非酒精因素引起的肝內嚴重的脂肪變性。超重與肥胖、高脂血癥等是非酒精性脂肪肝的主要病因。早期診斷、調節(jié)飲食、增加運動鍛煉、加強治療為預防和控制非酒精性脂肪肝的重要措施。
　　非酒精性脂肪肝包含一系列與肝內脂肪蓄積相關的病征,其發(fā)病機制錯綜復雜,研究認為非酒精性脂肪肝與脂質代謝異常、胰島素抵抗、肥胖和代謝綜合征等密切相關,其中脂質代謝

2、異常被廣泛認為是其發(fā)病的最主要和最基本機制之一。低密度脂蛋白受體(low density lipoprotein receptor, LDLr)和清道夫受體B族I型(scavenger receptor class B type I, SR-BI)及甲狀腺激素受體β1(thyroid hormone receptorβ1, TRβ1)在肝臟調控脂質代謝過程中發(fā)揮重要作用。
　　白藜蘆醇是一種生物學效應非常廣泛的植物多酚,其功效包括

3、減少脂質合成、抗炎、延長壽命等,有著治療多種慢性病的巨大潛力。
　　本實驗采用高脂高糖喂養(yǎng)大鼠形成非酒精性脂肪肝,研究白藜蘆醇對NAFLD的改善作用及作用機制(對TRβ1,LDLr和SR-BI表達的影響),為防治NAFLD提供新的思路。
　　本文從以下兩部分就白藜蘆醇改善大鼠非酒精性脂肪肝的機制研究進行了綜述。
　　第一部分:白藜蘆醇對大鼠非酒精性脂肪肝的改善作用
　　目的:高脂高糖飼料喂養(yǎng) Wistar雄性大鼠

4、,建立非酒精性脂肪肝的動物模型,觀察白藜蘆醇(resveratrol, Res)對非酒精性脂肪肝的改善作用。
　　方法: Wistar雄性大鼠40只,隨機平均分成4組:正常組(Control),高脂高糖組(HFS),兩個白藜蘆醇劑量組(HFS+Res1,HFS+Res2),劑量分別為50、100 mg/kg·bw。采用高脂高糖喂養(yǎng)方式建立大鼠非酒精性脂肪肝模型,實驗期間準確記錄體重、進食量等指標。基礎飼料由華中科技大學同濟醫(yī)學院實

5、驗動物學部提供,基礎飼料供能比為:蛋白質26.48％,脂肪10.19％,碳水化合物63.33％。高脂飼料供能比為:蛋白質18.33％,脂肪54.22％,碳水化合物27.45％(其中蔗糖7.8％)。13周末每組斷頭處死7只大鼠并檢測血清及肝勻漿總膽固醇(TC)、總甘油三酯(TG)含量;每組其余3只大鼠取出肝臟進行HE染色和油紅O染色。
　　結果:高脂高糖組大鼠體重、能量利用率、血清及肝臟 TC和TG明顯高于正常組,而白藜蘆醇干預有顯

6、著的改善效果;HE染色和油紅O染色能明顯觀察到高脂高糖組大鼠肝細胞明顯的脂肪變性,而白藜蘆醇各劑量組均得到了明顯的改善。
　　結論:高脂高糖喂養(yǎng)能引起大鼠肝臟嚴重的脂肪變性,引發(fā)非酒精性脂肪肝,而白藜蘆醇干預能起到明顯的改善作用。
　　第二部分:白藜蘆醇改善大鼠非酒精性脂肪肝的機制研究
　　目的:探究白藜蘆醇改善大鼠非酒精性脂肪肝過程中血清甲狀腺激素(TH)的變化,以及白藜蘆醇對甲狀腺激素受體β1(TRβ1),低密度脂

7、蛋白受體(LDLr)和清道夫受體B族I型(SR-BI)表達的影響。
　　方法:使用夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)試劑盒測定大鼠血清FT3和FT4含量。用TRIzol提取肝臟的總RNA,應用Real-Time RT-PCR檢測大鼠肝臟組織TRβ1,LDLr和SR-BI mRNA的表達水平;用RIPA裂解液充分勻漿裂解提取肝臟總蛋白,用Western blot方法檢測這三種基因的蛋白表達水平。
　　結果:
　　(1)

8、各組大鼠血清FT3、FT4之間無顯著性差異。
　　(2)白藜蘆醇能提高NAFLD大鼠肝臟LDLr和SR-BI mRNA和蛋白表達的水平,但是白藜蘆醇干預對TRβ1 mRNA和蛋白的表達均無影響。
　　結論:
　　(1)白藜蘆醇可能并未通過改變甲狀腺激素的含量來改善非酒精性脂肪肝。
　　(2)白藜蘆醇對大鼠非酒精性脂肪肝的改善作用可能是通過提高LDLr和SR-BI的表達來實現(xiàn)的,但此過程中LDLr和SR-BI不受T