CCR3在哮喘小鼠氣道組織Muc5ac表達(dá)中的作用.pdf

1、第一部分哮喘小鼠氣道炎癥和氣道黏液分泌的改變
　　 目的：觀察哮喘小鼠氣道炎癥和氣道黏液分泌的改變。方法：清潔級(jí)BALB/c小鼠20只隨機(jī)分為兩組：哮喘組（AS組）10只和正常組（NS組）10只，哮喘組用卵清白蛋白（OVA）致敏和激發(fā)制作哮喘模型，正常組用生理鹽水致敏和激發(fā)。通過(guò)檢測(cè)AS組小鼠支氣管肺泡灌洗液（BALF）細(xì)胞總數(shù)和細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，采用ELISA檢測(cè)BALF中的IL-4和TNF-α水平，通過(guò)HE染色觀察肺部病理學(xué)改變

2、，用阿爾辛藍(lán)-過(guò)碘酸雪夫（AB-PAS）染色氣道杯狀細(xì)胞，免疫組織化學(xué)檢測(cè)肺組織中黏蛋白5ac（Muc5ac）的表達(dá)及熒光定量RT-PCR檢測(cè)Muc5acmRNA在肺內(nèi)的表達(dá)。結(jié)果：哮喘組小鼠BALF中的細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞百分比，IL-4和TNF-α水平、肺組織AB-PAS陽(yáng)染面積，Muc5ac蛋白和mRNA表達(dá)明顯高于正常對(duì)照組小鼠（p<0.01或P<0.05）。結(jié)論：OVA致敏和激發(fā)的哮喘小鼠出現(xiàn)以嗜酸性粒細(xì)

3、胞、淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)為主的氣道炎癥及杯狀細(xì)胞增生的氣道黏液高分泌，且氣道炎癥和氣道黏液高分泌關(guān)系密切。
　　 第二部分 CCR3在哮喘小鼠氣道組織Muc5ac表達(dá)中的作用及SB328437干預(yù)的影響
　　 目的：通過(guò)應(yīng)CCR3拮抗劑SB328437干預(yù)哮喘組小鼠，探討CCR3在哮喘小鼠氣道Muc5ac表達(dá)中的作用。方法：清潔級(jí)BALB/c小鼠50只隨機(jī)分成正常對(duì)照組（NS組）、哮喘組（AS組）、地塞米松干預(yù)組（As+DEX組

4、）、SB328437干預(yù)組（AS+SB組）及溶劑對(duì)照組二甲基亞砜組（DMSO組），各10只。測(cè)定BALF中細(xì)胞總數(shù)和細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，采用ELISA檢測(cè)BALF中的IL-4和TNF-α水平，通過(guò)HE染色觀察肺組織病理學(xué)改變，AB-PAS對(duì)氣道杯狀細(xì)胞進(jìn)行染色，用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)氣道Muc5ac和肺組織CCR3蛋白的表達(dá)及熒光定量RT-PCR檢測(cè)Muc5ac mRNA、CCR3 mRNA在肺組織內(nèi)的表達(dá)。結(jié)果：AS組在BALF細(xì)胞總數(shù)、嗜酸

5、性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、IL-4，TNF-α水平、AB-PAS陽(yáng)染面積、黏蛋白Muc5ac、CCR3蛋白IOD及Muc5ac mRNA、CCR3mRNA表達(dá)與AS+SB組、AS+DEX組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01或P<0.05）。結(jié)論：CCR3可能介導(dǎo)哮喘小鼠的慢性氣道炎癥反應(yīng)和導(dǎo)致氣道黏蛋白基因Muc5ac mRNA的高表達(dá)和黏蛋白Muc5ac的高分泌。SB328437可能通過(guò)抑制肺組織CCR3 mRNA及其蛋白的表達(dá)而