3T3-L1細胞在不同糖脂水平中的分化與insig2基因的作用.pdf

1、目的：觀察胰島素誘導基因2(insulin-induced gene2,insig2)在不同糖脂水平誘導3T3-L1細胞分化中的作用,探討insig2在脂肪細胞分化中的作用。
　　方法：體外培養(yǎng)3T3-L1細胞(Tc)、轉染pcDNA3.1(+)的3T3-L1細胞(Kc)及轉染pcDNA3.1(+)-insig2的3T3-L1(Ic)細胞,分別置于高糖高脂(SF)、單純高糖對照(S)、低糖高脂(F)、單純低糖對照(D)的環(huán)境中分化

2、培養(yǎng)12天,油紅O染色后計算染色陽性細胞面積,RT-PCR法測定insig2、脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白2(adipocyte fattyacid-binding protein2,aP2)、固醇調節(jié)元件結合蛋白(sterol regulatoryelement-binding protein,SREBP)mRNA的表達。
　　結果：同種細胞在高糖的分化環(huán)境中,高脂與單純高糖對照處理后相比較,染色陽性細胞面積、aP2、insig2、

3、SREBP mRNA表達均無顯著差別(P>0.05);同種細胞在低糖的分化環(huán)境中,高脂與單純低糖對照處理后相比較,前者的染色陽性細胞面積、aP2、insig2、SREBPmRNA表達均較后者顯著升高(P<0.05);在四種分化環(huán)境中,分化前后轉染pcDNA3.1(+)-insig2的3T3-L1細胞中insig2基因持續(xù)高表達,且誘導分化第12天染色陽性細胞面積、aP2、SREBP mRNA表達均較對照組3T3-L1細胞及轉染pcDNA

4、3.1(+)的3T3-L1細胞顯著下調(P<0.05);3T3-L1細胞組與轉染pcDNA3.1(+)的3T3-L1細胞組比較,分化前后染色陽性細胞面積、aP2、insig2、SREBP mRNA表達均無顯著差別(P>0.05)。
　　結論：1.高糖和/或高脂即可促進脂肪細胞分化,而低糖低脂不利于脂肪細胞的分化2.insig2在細胞內的表達水平與脂肪細胞成熟及分化程度相關,與分化環(huán)境中糖脂濃度有一定關系;3.3T3-L1細胞在任何