基于核酸適體構(gòu)象開關的8-羥基脫氧鳥苷檢測新方法研究.pdf

1、8-羥基脫氧鳥苷是氧化應激過程中，羥自由基攻擊DNA形成的一種DNA氧化損傷產(chǎn)物，可誘導突變、堿基錯配等。研究發(fā)現(xiàn)它與機體的衰老、癌癥的發(fā)生和環(huán)境污染物等有一定的相關性，是目前國際公認的DNA氧化損傷生物標志物。建立簡便、靈敏、選擇性好的8-OHdG定量檢測方法，對研究癌癥發(fā)生、衰老機制等具有重要意義。
　　第二章，建立了一種靈敏度高、特異性強、成本低的比色傳感法。本法以未修飾的金納米粒子為指示探針，未修飾的核酸適體為特異性識別分

2、子，檢測人體尿液中8-OHdG。在8-OHdG存在的情況下，Apt構(gòu)象發(fā)生變化，由不規(guī)則螺旋結(jié)構(gòu)形成 G-四分體結(jié)構(gòu)，致使體系顏色發(fā)生改變，并且與8-OHdG濃度在5.60×10-9~2.82×10-7 mol·L-1范圍內(nèi)呈良好的線性關系，檢出限為1.68×10-9 mol·L-1，相對標準偏差為1.12％~4.19%(n=6)，加標回收率在95.9%~104.9%之間。新建方法無需任何儀器，可對樣品直接目測分析。
　　第三章，

3、建立了一種基于金納米粒子的共振光散射法檢測尿中8-OHdG的方法。在高鹽溶液中8-OHdG與Apt結(jié)合后，金納米粒子共振光散射強度增加，并且8-OHdG濃度在9.08×10-11~1.41×10-8 mol·L-1范圍內(nèi)，與溶液共振光散射強度之間存在良好的線性關系，線性回歸方程為ΔIRLS=10.7+12.7c(×10-9 mol·L-1)，檢出限為2.73×10-11 mol·L-1，本方法精密度較好，相對標準偏差在1.63%~3.4

4、6%(n=6)之間，已用于實際樣品檢測，結(jié)果滿意。
　　第四章，建立了一種金納米粒子分光光度法測定尿8-羥基脫氧鳥苷的方法，在pH為3.5的BR緩沖溶液中，8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)與金納米粒子作用，導致溶液吸光度比值改變，且在4.98×10-7 mol·L-1~1.27×10-5 mol·L-1范圍內(nèi)，吸光度值改變與8-OHdG的濃度呈良好的線性關系，其回歸方程為：Δ(A630/A520)=–0.00713+0.0812c