ATP-P2X7R調(diào)控急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎發(fā)作的機(jī)制研究.pdf

1、研究背景：痛風(fēng)是一種炎癥性疾病，IL-1β等炎癥性細(xì)胞因子被認(rèn)為是參與痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎發(fā)病的主要細(xì)胞因子。既往研究表明尿酸鹽晶體（MSU）可以通過(guò)多種途徑刺激IL-1β分泌，進(jìn)而參與痛風(fēng)發(fā)病。但是這種以MSU為致病信號(hào)的理論無(wú)法解釋部分高尿酸血癥患者從不出現(xiàn)痛風(fēng)發(fā)病的臨床現(xiàn)象，提示痛風(fēng)發(fā)病還存在其他致病信號(hào)。目前研究認(rèn)為，IL-1β分泌受多種信號(hào)通路調(diào)控，其中值得關(guān)注的是ATP誘導(dǎo)的嘌呤受體P2X7R信號(hào)途徑調(diào)控IL-1β分泌。有研究證實(shí)A

2、TP可通過(guò)刺激單核細(xì)胞表面P2X7R誘導(dǎo)IL-1β分泌，在痛風(fēng)發(fā)病中可能起重要作用。在痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎發(fā)作的誘發(fā)因素中，如酗酒、暴飲暴食等均存在ATP的劇烈波動(dòng)，提示ATP-P2X7R-IL-1β通路在痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病中可能起重要作用。
　　本課題組根據(jù)上述炎癥因子調(diào)控通路機(jī)制提出：痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的發(fā)作與 ATP激活P2X7信號(hào)系統(tǒng)有關(guān)，P2X7R可能是急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎潛在的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子；從分子機(jī)制探討了急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制，為

3、疾病的防治尋找一條新的途徑。本課題探索以ATP-P2X7R-IL-1β為靶標(biāo)調(diào)控痛風(fēng)急性發(fā)作的作用機(jī)制，將為完善痛風(fēng)的發(fā)病機(jī)理及其臨床防治提供了理論依據(jù)。
　　目的：探討ATP-P2X7R-IL-1β通路在調(diào)控痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎發(fā)病中的作用。
　　方法：分離痛風(fēng)與高尿酸血癥患者外周血白細(xì)胞，分別用尿酸鈉(MSU)和MSU+ATP（5′-三磷酸腺苷二鈉鹽水合物）刺激細(xì)胞培養(yǎng)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)培養(yǎng)上清液中IL-1β濃

4、度；采用多重液相蛋白定量技術(shù)（CBA）檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12和TNF的濃度；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血 CD14+P2X7R+細(xì)胞。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用t檢驗(yàn)、非參數(shù)檢驗(yàn)、配對(duì)樣本 t檢驗(yàn)、Pearson相關(guān)分析。
　　結(jié)果：1.單獨(dú)MSU刺激時(shí)，痛風(fēng)和高尿酸血癥患者細(xì)胞培養(yǎng)液中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF的濃度差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-1.334，P＞0.05；Z=-0.338，P＞

5、0.05；t=-0.998，P＞0.05；Z=-1.186，P＞0.05）；用MSU+ATP共同刺激白細(xì)胞時(shí)，痛風(fēng)患者培養(yǎng)液中IL-1β的濃度較高尿酸血癥患者顯著升高（Z=-2.081，P=0.037），痛風(fēng)與高尿酸血癥患者間培養(yǎng)液中IL-6、IL-8和TNF的濃度差別均沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-1.356，P＞0.05；Z=-1.366，P＞0.05；Z=-1.239，P＞0.05）。2.高尿酸血癥患者中，MSU刺激組和MSU+ATP共同

6、刺激組細(xì)胞培養(yǎng)液中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF濃度差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-1.429，P＞0.05；Z=-1.373，P＞0.05；t=-1.077，P＞0.05；Z=-1.287，P＞0.05）；痛風(fēng)患者中MSU+ATP共同刺激組IL-1β、IL-6、IL-8和TNF濃度均顯著高于MSU刺激組（Z=-2.548，P＜0.05；Z=-2.678，P＜0.05；t=-2.215，P＜0.05；Z=-3.233，P＜0.05）。

7、3.細(xì)胞培養(yǎng)液中未檢測(cè)出IL-10和IL-12。4.痛風(fēng)患者外周血中CD14+P2X7R+細(xì)胞的百分比顯著高于高尿酸血癥患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-3.567，P=0.001）；5.痛風(fēng)和高尿酸血癥患者CD14+P2X7R+細(xì)胞的百分比與細(xì)胞培養(yǎng)液 IL-1β濃度相關(guān)性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（r=-0.504，P＞0.05；r=-0.379，P＞0.05）。
　　結(jié)論：ATP參與了痛風(fēng)的發(fā)病，可能是引起急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎發(fā)病的重要信號(hào)；其受