疊鞘石斛化學(xué)成分研究及其綜合利用與開發(fā).pdf

1、目的：本課題在科技部“十二五”支撐項(xiàng)目——石斛規(guī)范化種植基地及其SOP優(yōu)化、升級研究（2011BAI13B02-8）的資助下，對川產(chǎn)道地藥材疊鞘石斛與金釵石斛、鼓槌石斛、流蘇石斛之間及疊鞘石斛不同部位（莖、葉、花）化學(xué)成分指紋圖譜及含量進(jìn)行對比研究，以期發(fā)現(xiàn)疊鞘石斛與三者間的生物親緣關(guān)系及對疊鞘石斛的綜合利用提供參考；并對疊鞘石斛化學(xué)成分進(jìn)行分離鑒定，闡明疊鞘石斛的化學(xué)成分類型，為其質(zhì)量控制提供一定的依據(jù)；并對疊鞘石斛進(jìn)行配方顆粒的制備

2、研究，擴(kuò)大其應(yīng)用范圍，增加種植者的經(jīng)濟(jì)收入，提高種植積極性，進(jìn)一步帶來更大的效益，為石斛資源的可持續(xù)利用和合理開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
　　方法：采用薄層色譜法、紫外-可見分光光度法、高效液相色譜法、氣相色譜等現(xiàn)代分析技術(shù)，從“薄層色譜——高效液相色譜——?dú)庀嗌V——單體成分/組分含量”四個(gè)方面，對疊鞘石斛與金釵石斛、鼓槌石斛、流蘇石斛及疊鞘石斛莖、葉、花化學(xué)成分進(jìn)行對比研究；采用現(xiàn)代色譜分離方法及分析手段，對疊鞘石斛化學(xué)成分進(jìn)行分離鑒定，

3、并對其進(jìn)行含量測定；從提取、干燥工藝，輔料選擇，成型工藝等方面對疊鞘石斛配方顆粒進(jìn)行制備工藝研究。
　　結(jié)果：四種石斛對比
　　疊鞘石斛中含有石斛酚，但未檢出石斛堿和毛蘭素。TLC與 HPLC結(jié)果互為補(bǔ)充，直觀顯示四種石斛在化成成分上的異同點(diǎn)。脂溶性成分GC-MS對比分析結(jié)果對其具有一定的相同成分作出了驗(yàn)證。相同色譜信息表明具有同化學(xué)成分，作為同屬植物其可能具有相類似的功效；特異性色譜信息表明其在化學(xué)成分上有所差異，在具體功

4、效主治上是否完全相同應(yīng)加以重視；對比結(jié)果提示疊鞘石斛及流蘇石斛化學(xué)成分的研究具有較大的潛力。
　　含量測定結(jié)果顯示，在糖類成分含量上金釵石斛與流蘇石斛較為接近，鼓槌石斛與疊鞘石斛較為接近，推測其在調(diào)節(jié)機(jī)體免疫、抗腫瘤及調(diào)節(jié)血糖等方面具有類似藥效，但在使用劑量上應(yīng)有所不同。四種石斛中石斛酚含量差異較大，流蘇石斛與疊鞘石斛中含量較高約為220μg/g，提示其在抗糖尿病性白內(nèi)障方面具有一定的研究價(jià)值。
　　通過游離糖類衍生化后GC

5、-MS分析結(jié)果可知，四種石斛中均主要檢出鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖和葡萄糖，均未檢出乳糖，金釵石斛亦檢出含有半乳糖。
　　疊鞘石斛莖、葉、花對比
　　TLC對比結(jié)果顯示，疊鞘石斛莖的色譜斑點(diǎn)較為豐富；HPLC對比結(jié)果顯示，葉和花色譜峰信息較為豐富，且與莖中化學(xué)成分具有一定的相似性，推測其可能具有相同的化學(xué)成分及類似功效。GC-MS結(jié)果顯示疊鞘石斛莖、葉、花有4種共有成分，且莖與葉、花分別有8種、13種共有成分；莖中烷烴類成分含

6、量較高，而葉和花中脂肪酸、酯類含量較高，且成分種類明顯多于莖；提示疊鞘石斛葉化學(xué)成分具有一定的研究意義，可為其綜合利用提供依據(jù)。
　　糖類成分含量測定結(jié)果表明，莖中除還原糖含量明顯低于葉外，多糖及水溶性總糖的含量均高于葉中含量。測定結(jié)果提示可對疊鞘石斛葉在多糖所具的藥理活性方面具有一定的研究價(jià)值。
　　疊鞘石斛化學(xué)成分分離鑒定及含量測定
　　對疊鞘石斛乙酸乙酯部位化學(xué)成分進(jìn)行分離純化，共鑒定出17個(gè)化合物，其中4,5-

7、二羥基-2-甲氧基-9,10-二氫菲、丁香酸、大黃素、松柏醛、香蘭素、鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯、5-乙酰氧甲基糠醛、丁香醛、5-羥甲基糠醛、香草酸均為首次從疊鞘石斛中分離。
　　采用HPLC法對疊鞘石斛中4,5-二羥基-2-甲氧基-9,10-二氫菲含量進(jìn)行測定，結(jié)果表明其含量為17.42μg/g，其含量測定結(jié)果為疊鞘石斛的質(zhì)量控制提供了一定的參考。4,5-二羥基-2-甲氧基-9,10-二氫菲及柚皮素分離純化，為疊鞘石斛具有抗癌

8、活性的藥理作用提供了一定的依據(jù)；石斛酚與丁香酸的分離純化，為疊鞘石斛在抗糖尿病性白內(nèi)障方面可能具有藥理活性提供了一定的參考。
　　疊鞘石斛配方顆粒制備工藝研究
　　通過實(shí)驗(yàn)研究，確定了疊鞘石斛配方顆粒的制備工藝；通過中試研究，證明該工藝可用于工業(yè)化生產(chǎn)且穩(wěn)定可行；對中試樣品進(jìn)行含量測定，其指標(biāo)性成分轉(zhuǎn)移率達(dá)82.8％，表明該工藝符合工業(yè)化生產(chǎn)要求。該配方顆粒的研制，為擴(kuò)大疊鞘石斛市場范圍及其后續(xù)產(chǎn)品開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。