蒲公英中脂烯?；d體蛋白還原酶抑制成分研究.pdf

1、脂肪酸是細胞生物膜的重要組成成分，故在細菌體內(nèi)，脂肪酸的合成是必需的。本實驗主要研究長白山藥用植物蒲公英中能抑制脂烯?；d體蛋白還原酶[enoyl-(acyl-carrier–protein)reductase I，F(xiàn)abI]的有效成分及作用機理。
　　蒲公英是一種常用于清熱解毒的中藥，全國各地普遍野生。主治疔瘡腫毒、乳癰、瘰疬、咽痛、目赤、濕熱黃疸痛等。最近實驗研究表明，蒲公英具有抗氧化、抗菌、抗腫瘤和抗炎等多種作用，但大多數(shù)藥

2、理研究都是以蒲公英粗提物為研究對象。為進一步研究其抗菌活性成分，本實驗以采自和龍市的蒲公英為材料，以活性追蹤分離純化蒲公英中具有抑菌活性的單體化合物，為蒲公英的藥理研究和臨床應用提供理論依據(jù)。
　　本實驗對蒲公英地上部分和地下部分分別用50％乙醇回流提取，再分別用石油醚、乙酸乙酯萃取，以金黃色葡萄球菌和變形鏈球菌對各組分進行體外抑菌實驗篩選。最后確定蒲公英抗菌活性有效部位為石油醚和乙酸乙酯部位。
　　采用硅膠柱色譜、羥丙基葡

3、聚糖凝膠色譜和高效液相色譜等分離方法并以抑制變形鏈球菌活性追蹤，從地上部分石油醚層分離得到1個化合物，從地上部分乙酸乙酯層分離得到了2個具有抗菌活性的單體化合物。應用現(xiàn)代波譜技術(shù)（1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、GC-MS等）和多種化學方法鑒定了其結(jié)構(gòu)，分別為化合物I（亞油酸）、化合物II（亞麻酸）和化合物III（棕櫚酸）?；衔颕和化合物II分別與H2SO4/CH3OH反應，得到化合物IV(亞油酸甲酯)和化合物V(

4、亞麻酸甲酯)。
　　用兩倍連續(xù)稀釋法測其對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、變形鏈球菌、枯草芽孢桿菌等的最小抑菌濃度（Minimal inhibitory concentration，MIC）值，其中化合物I和化合物II對金黃色葡萄球菌MIC值分別為128μg/mL和64μg/mL，對變形鏈球菌的MIC值分別為16μg/mL和16μg/mL，對枯草芽孢桿菌MIC值分別為4μg/mL和4μg/mL?；衔颕I對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌和耐喹

5、諾酮金黃色葡萄球菌亦有抗菌活性，MIC值為64μg/mL。化合物III、化合物IV和化合物V對以上菌種均無活性。
　　本實驗測試了化合物I到化合物V對細菌脂肪酸合成酶的抑制活性，其結(jié)果化合物I和化合物II對FabI的IC50(μM)值分別為30.2和75.2，其他3個化合物均未顯示出對FabI有抑制作用?；衔颕到化合物V對FabK和FabG均未顯示出抑制活性。實驗結(jié)果說明，蒲公英中亞油酸和亞麻酸是通過抑制FabI而引起抗菌作用。