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文檔簡介
1、實驗室保存有一株可高效降解有機磷農藥毒死蜱的細菌菌株,經菌種鑒定確定為新種,命名為Cupriavidus nantongensis X1,南通嗜通菌X1。本文測定了該菌株對9種供試有機磷農藥的降解特性并對三唑磷、對硫磷及水胺硫磷的初步代謝產物和代謝路徑進行了推測;以化學轉化方法對其進行了熒光基因標記,并測定標記菌株的遺傳穩(wěn)定性,以期研究標記菌株在石英砂填裝的模擬柱中的遷移動態(tài);提取接種于土壤中的南通嗜銅菌X1菌體RNA,確定了能提取RN
2、A的最低接菌量,以嘗試測定基因實時表達量,追蹤菌株在石英砂環(huán)境中的實際降解活性。
結果顯示,南通嗜銅菌X1對供試的9種有機磷農藥均有降解效果,其中對硫磷、三唑磷及水胺硫磷在24h內的降解率達到了100%,丙溴磷的降解率達到60%以上,倍硫磷、馬拉硫磷及硫線磷的降解率在45%左右,殺撲磷和樂果的降解率較低,在20%左右;推測出三唑磷、對硫磷及水胺硫磷的初步代謝產物和代謝路徑。
檢測質粒遺傳穩(wěn)定性,顯示外源導入的帶有 l
3、uxAB基因的質粒遺傳穩(wěn)定,研究南通嗜銅菌X1的土壤環(huán)境行為,對其進行l(wèi)uxAB基因標記以輔助研究是可行的;從熒光遺傳穩(wěn)定性實驗中每次轉接涂布的平板上挑取單菌落,分別測定10次轉接的菌株對200 mg?L-1毒死蜱12h的降解效果,結果顯示,在10代的傳代過程中,標記菌株的降解效能未發(fā)生明顯的衰退,12h對200mg?kg-1毒死蜱的降解率均維持在50%左右。
成功提取接種到滅菌土壤中的菌株的總 RNA,確定在目前的實驗條件下
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