重組腺相關病毒介導的人C5L2基因治療高脂飲食誘導的Wistar大鼠脂肪肝.pdf

1、【研究目的】近幾年研究證明C5L2是促?；鞍?acylation-stimulatingproteinASP)的唯一功能受體,并且與糖脂代謝相關,ASP-C5L2通路激活增加二酰基甘油?；D(zhuǎn)移酶(DGAT)活性,刺激葡萄糖的吸收,抑制激素敏感性脂肪酶(HSL)的活性,還具有刺激胰島素分泌的功能,從而促進脂肪組織甘油三酯的合成并儲存于脂肪組織。Nonalcoholicfattyliverdisease(NAFLD)是由于肝臟脂質(zhì)沉積過多

2、引起,是在肝臟中的表現(xiàn)的代謝紊亂綜合征,與糖脂代謝紊亂和炎癥有密切聯(lián)系。越來越多的研究提示高表達C5L2基因可能會減少肝臟的脂肪沉積,從而改善肝脂肪變性。有研究表明當323位絲氨酸突變?yōu)楫惲涟彼岷蠹碨323I-C5L2使基因C5L2失去功能。本研究設想高表達C5L2基因可以緩解脂肪變性治療NAFLD,而S323I-C5L2突變對NAFLD沒有作用。
　　【研究方法】用高脂飼料(脂肪提供60％能量)飼養(yǎng)八周齡的Wistar大鼠,12

3、周后誘導NAFLD模型,重組腺相關病毒介導基因C5L2(rAVV-C5L2)及S323I-C5L2(rAVV-S323I-C5L2)經(jīng)尾靜脈注射入大鼠體內(nèi),從而在大鼠體內(nèi)安全地表達C5L2及S323I-C5L2基因。治療8周后,處死大鼠,檢測血漿生化指標,用Westernblot檢測C5L2蛋白在肝臟組織地表達情況,通過HE染色和肝臟甘油三酯含量評價肝臟脂肪變性,采用westernblot檢測肝臟組織IκBα/NF-κB炎癥通路各分子表

4、達,Real-time方法檢測肝臟組織炎癥因子TNF-α和IL-6的mRNA水平。綜合評價C5L2基因?qū)Ω咧T導的NAFLD的影響。
　　【研究結(jié)果】(1)重組腺相關病毒介導人C5L2基因可以在動物體內(nèi)穩(wěn)定的表達C5L2受體;(2)在高脂組,C5L2基因過表達顯著降低血清甘油三酯(TG)、葡萄糖、FFA水平;明顯降低肝臟甘油三酯含量,減輕由高脂引起的脂肪變性;(3)在高脂組,C5L2高表達降低了TNF-α和IL-6的mRNA水平并