GLP-1通過WNT通路改善肝臟胰島素抵抗機制探討.pdf

1、目的：研究GLP-1對糖尿病小鼠的作用及其改善肝臟胰島素抵抗可能的分子生物學機制。
　　方法：將db/db小鼠分為兩組，一組為生理鹽水組（對照），一組為利拉魯肽組，同時在相同的飼養(yǎng)環(huán)境下飼養(yǎng)。兩組動物每天分別腹腔注射生理鹽水與利拉魯肽，干預8周，檢測小鼠的體重，血糖，胰島素和HOMA-IR。取肝臟石蠟包埋固定，H-E染色觀察。提取動物肝臟的蛋白和RNA，用Western Blots和real-time PCR方法檢測糖異生酶與WN

2、T通路相關蛋白與RNA的表達情況。與此同時在體外用FFA干預HepG2細胞，建立胰島素抵抗模型。利用siRNA轉(zhuǎn)染技術使β-catenin沉默，不同利拉魯肽濃度10-8mol/L，10-7mol/L干預細胞，Western Blots檢測p-FoxO1，PEPCK，G6Pase和WNT信號通路相關蛋白的表達水平。GOD-POD法檢測培養(yǎng)基中葡萄糖剩余量。結(jié)果：與對照組相比，利拉魯肽組干預四周開始，體重顯著減輕，血糖下降，胰島素水平減低，

3、HOMA-IR值降低，且作用一直持續(xù)到實驗結(jié)束。利拉魯肽治療后肝臟結(jié)構(gòu)改善，脂滴減少。利拉魯肽組肝臟內(nèi)的G6Pase與PEPCK的表達減少，而β-catenin的表達則明顯增加。體外實驗中，高脂干預成功建立細胞胰島素抵抗模型，該模型細胞糖異生增加，葡萄糖攝取率降低。當利拉魯肽濃度為10-7mol/L時糖異生減弱最明顯，葡萄糖攝取增加。而阻斷β-catenin后，利拉魯肽干預并未使糖異生減少，葡萄糖攝取增加。
　　結(jié)論：利拉魯肽可降