環(huán)氧合酶2選擇性抑制劑塞來昔布對胰腺癌化療和放療的增敏作用及其機制.pdf

1、復旦大學博士學位論文環(huán)氧合酶2選擇性抑制劑塞來昔布對胰腺癌化療和放療的增敏作用及其機制姓名：徐剛申請學位級別：博士專業(yè)：內(nèi)科學（消化）指導教師：王興鵬靖大道20050427li太學博士研競生曲文環(huán)氕夸●2譴鐸攔掙刪利塞采鼉希對蕞|穗化磚和t本辭增t雄船A茸機制昔布能明顯增加體外培養(yǎng)的胰腺癌細胞和移植瘤組織的腫瘤細胞凋亡；促凋亡基因bax表達上調(diào)，抗凋亡基因bcl2的表達下調(diào)。3流式細胞術檢測提示，塞來昔布可誘導SWl990細胞阻滯于Go

2、／GI期，塞來昔布和吉西他濱聯(lián)合應用細胞周期阻滯作用更為明顯。Westem印跡法檢測細胞周期相關蛋白表達，其表達變化與周期分布的改變相一致。4胰腺癌細胞體外血管生成分析、雞胚尿囊膜血管生成模型和裸鼠移植瘤組織MVD檢測均表明，塞來昔布可抑制胰腺癌新生血管形成，與吉西他濱聯(lián)合后，抑制血管生成作用無明顯增強。細胞體外侵襲力測定和雞胚尿囊膜移植瘤侵襲模型均提示。塞來昔布可降低胰腺癌細胞侵襲力，塞來昔布與吉西他濱聯(lián)合，對胰腺癌細胞侵襲力的抑制作

3、用無明顯增加。RTPCR、明膠酶譜和反式明膠酶譜分析表明，塞來昔布抑制胰腺癌細胞分泌和激活MMP一2和MMP9，但對TIMP一1和TIMP2的分泌和激活無明顯影響，聯(lián)合吉西他濱前后，MMP，2、MMP9、TIMP1和TIMP2的分泌和活性無明顯改變。主要結論及意義：COX一2選擇性抑制劑塞來昔布對吉西他濱治療胰腺癌有增敏作用，其機制涉及細胞凋亡的誘導和細胞周期阻滯，與腫瘤新生血管生成受抑制和腫瘤細胞侵襲力的降低關系并不密切。第二部分環(huán)氧

4、合酶2選擇性抑制劑塞來昔布對胰腺癌放療增敏作用及機制研究研究目的：研究環(huán)氧合酶2(cyctooxygenase一2，COX一2)選擇性抑制剎塞來昔布聯(lián)合放射治療對胰腺癌的作用，并從細胞凋亡、細胞周期改變、腫瘤新生血管形成和細胞侵襲力等方面探討塞來昔布的作用機制。旨在闡明COX2選擇性抑制劑對胰腺癌放療的增敏作用及其可能機制。研究方法：1克隆形成實驗(平板法)檢測COX2選擇性抑制劑塞來昔布、放療及其聯(lián)合作川對胰腺癌細胞系SWl990細胞

5、增殖的抑制作用。建立SWl990細胞裸鼠移植瘸模型，分別給予塞來昔布、放療或兩者聯(lián)合干預。免疫組化染色研究裸鼠移植瘤組織中增殖細胞核抗原(PCNA)表達。Western印跡法檢測SWI990細胞PCNA蛋白表達。2原位缺口末端標記法(TUNEL)研究胰腺癌細胞凋亡，RTPCR檢測bcl2凋亡相關基因的表達。3體外血管生成測定和體外侵襲力測定方法鹼測胰腺癌細胞新生血管生成情況和細胞侵襲力的改變，免疫組化染色標記裸鼠杉拉瘤新生血管壁IV型膠