成骨生長肽羧基端五肽衍生物G48A與阿侖膦酸鈉的序貫治療對(duì)OVX大鼠骨代謝的影響.pdf

1、目的：綜合離體骨密度（BMD）、骨灰重/干重、骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)分析和生物力學(xué)試驗(yàn)，評(píng)價(jià)成骨生長肽羧基端五肽OGP（10-14）衍生物G48A與阿侖膦酸鈉（Alen）的聯(lián)合與序貫預(yù)防治療方案（ADFR方案）對(duì)去卵巢大鼠骨代謝影響。 方法：3月齡雌性SD大鼠75只，按體重分層隨機(jī)分為7組，以10％水合氯醛腹腔注射麻醉。假手術(shù)組（SHAM組）找到卵巢后不予切除即分層縫合，其余均行雙側(cè)卵巢切除術(shù)（OVX）。術(shù)后穩(wěn)定1周，體質(zhì)量為215-

2、285g。G48A1組、G48A2和G48A3組為序貫預(yù)防治療組，每組各11只，按ADFR方案根據(jù)給藥周期不同分別以5 d-5 d-5 d、10 d-10 d-5 d、14 d-14 d-7 d的時(shí)間間隔以“皮下注射G48A100 nmol·kg-1·d-1-Alen100μg·kg-1·d-1-間歇停藥”的循環(huán)模式給藥，分別給藥6（12周）、4（14周）、3（14周）個(gè)循環(huán)；NADFR組（聯(lián)合預(yù)防治療組）11只，按上述劑量每天予G48

3、A聯(lián)合ALEN皮下注射；ALEN組11只，按上述劑量每天皮下注射ALEN。OVX組和SHAM組各10只，每日均皮下注射0.1 mL的PBS液。給藥14周后頸椎脫位法處死大鼠。分離大鼠子宮、腎臟測(cè)定重量；取左股骨和腰椎L1-4用雙能X線骨密度儀（DEXA）小動(dòng)物軟件測(cè)定全段BMD；取左側(cè)股骨測(cè)量灰重/干重比值；取左脛骨近端干骺端制備不脫鈣骨切片，行骨計(jì)量學(xué)分析；取腰椎L5行腰椎壓縮試驗(yàn)，右股骨行股骨三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)檢測(cè)其生物力學(xué)性能。所得資料

4、以SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果： 1.處死時(shí)各OVX術(shù)后組子宮濕重明顯低于SHAM組；所有預(yù)防治療組子宮內(nèi)膜形態(tài)學(xué)與OVX組相似，腎臟的濕重及形態(tài)學(xué)表現(xiàn)各組相似。 2.BMD：與OVX組比，除G48A3組腰椎BMD外，SHAM組和各預(yù)防治療組的腰椎和股骨BMD均明顯高于OVX組；G48A1組的腰椎和股骨BMD較G48A2、G48A3組增加，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；與ALEN組比，G48A2、G48A3組及NA

5、DFR組的股骨BMD降低，但各序貫預(yù)防治療組和NADFR組的腰椎BMD無差異；與SHAM組比，G48A1、ALEN組的股骨BMD顯著增加。 3.股骨灰重/干重：與OVX組比較，SHAM、NADFR組、ALEN組有升高趨勢(shì)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；G48A2組較ALEN組減低。 4.骨計(jì)量：（1）OVX組較SHAM組骨小量密度、連接性減低，相對(duì)類骨質(zhì)體積減少但類骨質(zhì)表面積增加，骨表面激活頻率也增加；（2）與OVX組比，各序貫預(yù)防治

6、療組的骨小梁密度、連接性均增加，骨表面激活頻率減低；與SHAM組比，G48A2、G48A3組的相對(duì)類骨質(zhì)體積減少；與ALEN組比，各序貫預(yù)防治療組的骨小梁密度、連接性減低、骨表面激活頻率增加，G48A1、G48A2組的骨小梁量減少，G48A2組骨礦化沉積率和組織水平骨形成率增加；與NADFR組比，各序貫預(yù)防治療組骨小梁間距增加，但骨小梁厚度和連接性無差異，相對(duì)類骨質(zhì)表面減少，G48A3組的相對(duì)類骨質(zhì)體積減少；各序貫預(yù)防治療組問相比，G4

7、8A1、G48A2組的骨小梁密度較G48A3組增加；（3）與OVX組比，NADFR組骨小梁量、密度、連接性均增加，類骨質(zhì)增加，但骨轉(zhuǎn)換指標(biāo)減低；與SHAM組比，NADFR組相對(duì)類骨質(zhì)表面積增加，組織水平骨形成速率減低；與ALEN組比，NADFR組骨小梁密度減低，類骨質(zhì)量增加，骨轉(zhuǎn)換活躍；（4）與OVX組比，ALEN組骨小梁間距增大、接點(diǎn)數(shù)減少，骨轉(zhuǎn)換指標(biāo)減低；與SHAM組比，ALEN組骨小梁密度、連接性增加，骨轉(zhuǎn)換指標(biāo)均減低。

8、5.腰椎生物力學(xué)：（1）OVX組較SHAM組最大載荷、比例極限、彈性模量均降低；（2）與OVX組比，各序貫預(yù)防治療組彈性載荷、比例極限、彈性模量均升高；與ALEN組比，G48A1、G48A2組的彈性載荷增加，G48A2組的彈性模量增加，G48A1組的能量吸收高于OVX、SHAM、ALEN、NADFR各組；（3）與OVX組比，NADFR組彈性載荷、最大載荷、比例極限、彈性模量均增加；與ALEN組比，NADFR組彈性模量、比例極限升高；（4

9、）與OVX組比，ALEN組各指標(biāo)均無差異；與SHAM組比，ALEN組比例極限、彈性模量均降低。 6.股骨生物力學(xué)；（1）OVX組較SHAM組彎曲能量降低；（2）與OVX組比，G48A1、G48A3組彎曲彈性模量、彎曲剛性系數(shù)增加，G48A1、G48A2組最大載荷增加，G48A2組彈性載荷減低；與SHAM組比，所有序貫預(yù)防治療組彎曲能量減低，G48A2組彈性載荷減低；與ALEN組比，G48A2組彎曲彈性模量、彎曲剛性系數(shù)減低；與N

10、ADFR組比，G48A2組彈性載荷減低；各序貫預(yù)防治療組相比，G48A1組較G48A2、G48A3組彈性載荷增加，G48A1組較G48A3組彎曲能量增加；（3）NADFR組較OVX組彎曲彈性模量和彎曲剛性系數(shù)增加，較SHAM組彎曲能量降低；（4）ALEN組較OVX組彎曲彈性模量和彎曲剛性系數(shù)增加；ALEN組較SHAM組彈性載荷和彎曲能量降低。 結(jié)論： 1.OGP（10-14）和Alen的序貫預(yù)防治療方案行之有效。本研究中