惡性轉(zhuǎn)化基因Tx SNP功能研究及全長cDNA克隆.pdf

1、中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文惡性轉(zhuǎn)化基因TxSNP功能研究及全長cDNA克隆姓名：任維申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：曹亞20041101任維博士學(xué)位論文惡性轉(zhuǎn)化基因TxSblP功能研究及全長eDNA克隆的SNP位點(diǎn)，但不能認(rèn)為這兩個(gè)位點(diǎn)與鼻咽癌易感性有關(guān)：發(fā)現(xiàn)Tx存在一些這些低頻突變，這些位點(diǎn)是否為SNP位點(diǎn)及其生物學(xué)意義尚、／不能確定4本研究不僅首次探討了Tx和IgK基因存在SNP位點(diǎn)且基因型與腫瘤易感性相關(guān)，

2、從全新的角度探討了上皮性腫瘤發(fā)生的遺傳學(xué)背景，并有助于闡明上皮性腫瘤細(xì)胞表達(dá)免疫球蛋白的機(jī)制。rfIg基因本身及其表達(dá)方式十分復(fù)雜，其基因組序列長并存在重、組，異常的缺乏v區(qū)的Tx表達(dá)和重組方式更不明確；從現(xiàn)有的生物信息學(xué)資源中無法獲得正常B細(xì)胞來源的IgK輕鏈基因全長eDNA序列，導(dǎo)致Tx全長eDNA特別是57末端序列的不可預(yù)測；IMAGE數(shù)據(jù)庫中相關(guān)的序列長度不足而不適用；此外在朗病毒陰性的上皮性腫瘤細(xì)胞系中Tx表達(dá)豐度低，以上因素

3、都給克隆其全長eDNA帶來了難度。從EST策略入手，采用CNE2細(xì)胞進(jìn)行RACE，采用宮頸癌細(xì)胞HeLaeDNA文庫篩選，獲得了其eDNA的c區(qū)、異常表達(dá)的內(nèi)含子序列和37末端，長度達(dá)13kb(并接近northern提示的全長eDNA長度)但未能獲得最后的5’末端。結(jié)果提示Tx表達(dá)方式與正常IgK不同，這一異常的轉(zhuǎn)錄本在上皮性腫瘤細(xì)胞中的意義值得進(jìn)一步探討：此外，將為改進(jìn)方法進(jìn)一步獲得其5’端以及獲得可能的其他轉(zhuǎn)錄本提供實(shí)，●驗(yàn)基礎(chǔ)和線