枯草芽孢桿菌防治番茄灰霉病及其作用機(jī)制與發(fā)酵水平研究.pdf

1、該研究采用平板對(duì)峙法測(cè)定了供試的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)BS-208、BS-209和BS-21及蠟質(zhì)芽孢桿菌(Bacillus cereus)BC-01對(duì)番茄灰霉病菌(Botrytiscinerea)的抑制作用.在溫室條件下測(cè)定了它們對(duì)番茄灰霉病的保護(hù)作用和治療作用,并于2002年和2003年在田間條件下測(cè)定了BS-208和BS-209菌株制劑對(duì)番茄灰霉病的防治效果.結(jié)果表明,枯草芽孢桿菌BS-208、BS-2

2、09和BS-21及蠟質(zhì)芽孢桿菌BC-01對(duì)番茄灰霉病菌的抑菌率分別為78.06％、82.49%、75.74%和73.84%;溫室盆栽試驗(yàn)表明只有BS-208和BS-209菌株對(duì)番茄灰霉病有較好的保護(hù)作用,兩菌株發(fā)酵液和菌體處理后24、48 h接種病菌,防效均達(dá)75%以上,好于0 h接種的防效,但無(wú)菌濾液防治效果較差;BS-208和BS-209菌株的發(fā)酵液和無(wú)菌濾液對(duì)番茄灰霉病表現(xiàn)出較高的治療活性,BS-21和BC-01菌株發(fā)酵液的治療活

3、性很低.兩年的田間試驗(yàn)表明枯草芽孢桿菌BS-208和BS-209制劑對(duì)番茄灰霉病均具有良好的防治效果,并且防效隨濃度加大而提高,以800倍的防效最好,兩菌株制劑800倍液連續(xù)三次施藥后防效均達(dá)到74%以上,并且BS-208菌株的防效略高于BS-209菌株.通過(guò)對(duì)BS-208菌株與BS-209菌株生理生化特征的測(cè)定,結(jié)果表明兩菌株的生理生化特征基本上是一致的.對(duì)BS-208和BS-209菌株生長(zhǎng)曲線測(cè)定,結(jié)果表明在PDB液體培養(yǎng)基中BS-

4、208和BS-209分別在培養(yǎng)24 h和28 h達(dá)到最高的生長(zhǎng)量,都在48h形成芽孢.通過(guò)測(cè)定化學(xué)藥劑對(duì)兩菌株生長(zhǎng)影響,結(jié)果表明在烯唑醇、甲基托布津、多菌靈、粉銹寧、多抗霉素、吡蟲啉、辛硫磷、阿維菌素、高效氯氰菊酯和銳勁特田間使用的最高濃度下,基本上不影響兩菌株的生長(zhǎng)和芽孢形成,而代森錳鋅可以完全抑制兩菌株的生長(zhǎng).采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定BS-208和BS-209菌株對(duì)番茄灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用.在溫室和田間條件下研究了BS-208和BS

5、-209在番茄葉面和體內(nèi)的定殖與傳導(dǎo).通過(guò)針刺接種利福平標(biāo)記的BS-208和BS-209菌株,24 h后就可在全株各個(gè)部位分離到目的菌.在溫室和田間條件下,BS-208菌株的定殖菌量分別為11×108~5.6×108cfu/g鮮葉和15×108~0.02×108cfu/g鮮葉,BS-209菌株的定殖菌量分別為222×106~55×106cfu/g鮮葉和205×106~0.48×106 cfu/g鮮葉;印象法觀察發(fā)現(xiàn)BS-208和BS-2

6、09菌株在葉片上都能定殖,但BS-208的定殖能力強(qiáng)于BS-209菌株;掃描電鏡觀察表明,BS-208菌株在番茄葉面分布不均勻,大多定殖于傷口周圍、葉面的凹陷處和絨毛的根部.通過(guò)測(cè)定與抗病性有關(guān)的酶活性結(jié)果表明,接種BS-208菌株發(fā)酵液48 h后PAL、POD活性達(dá)到最大值,隨后PPO在96 h達(dá)到最大值.對(duì)BS-208菌株的無(wú)菌濾液的酸堿穩(wěn)定性、熱穩(wěn)定性進(jìn)行了測(cè)試.在搖瓶中對(duì)BS-208和BS-209的發(fā)酵培養(yǎng)基及發(fā)酵條件進(jìn)行了篩選