2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、生長激素釋放肽(Ghrelin)是生長激素促分泌素受體(GHS-R)的一種內(nèi)源性配體,1999年從小鼠和人的胃組織中成功分離并鑒定。Ghrelin對于下丘腦-垂體-性腺的內(nèi)分泌和旁分泌效應(yīng)為新近的研究熱點。本試驗以小梅山豬為實驗材料,研究Ghrelin在小梅山豬生殖軸的表達(dá)情況,旨在探究Ghrelin對動物繁殖性能的影響,從而為豐富動物生殖機理和早熟品種選種選育提供理論依據(jù)。
   根據(jù)NCBI上已發(fā)表的野豬Ghrelin mR

2、NA序列,在跨外顯子序列處設(shè)計一對引物。采集小梅山豬胃底腺組織,利用Trizol法提取總RNA,然后用RT-PCR法進(jìn)行cDNA擴(kuò)增,獲得了長度為341bp的目的片段。運用TA克隆法,將目的片段連接到pMD19-T載體上,通過藍(lán)白斑篩選和菌液PCR對重組質(zhì)粒進(jìn)行鑒定。測序后進(jìn)行比對發(fā)現(xiàn),目的片段長度為341bp,其編碼的氨基酸與人Ghrelin氨基酸有3個氨基酸不同,同源性為89.3%;與沙鼠、小鼠、大鼠、犬也有3個氨基酸不同,同源性均

3、為89.3%;與牛、綿羊有6個氨基酸不同,同源性為78.6%;與雞有13個氨基酸不同,同源性為53.6%。這為分離、克隆小梅山豬Ghrelin基因全序列提供了可能。
   采集初生、初情期以及性成熟公小梅山豬垂體、下丘腦、睪丸、附睪和母小梅山豬垂體、下丘腦、卵巢、子宮組織,利用Trizol法提取總RNA。RT-PCR法對其進(jìn)行組織表達(dá)譜研究,發(fā)現(xiàn)在上述組織中均有Ghrelin mRNA的表達(dá),表明Ghrelin mRNA的表達(dá)在

4、小梅山豬上不具有組織特異性。
   利用實時熒光定量PCR法測定母小梅山豬生殖軸各組織中Ghrelin mRNA相對表達(dá)豐度變化。結(jié)果表明:根據(jù)性成熟生殖軸不同組織Ghrelin mRNA表達(dá)量分析,以性成熟小梅山豬卵巢Ghrelin mRNA表達(dá)量為校正樣本,表達(dá)量為1,下丘腦相對表達(dá)量為0.449,垂體相對表達(dá)量為0.316,與卵巢差異顯著(P<0.05),垂體與下丘腦之間差異不顯著(P>0.05);根據(jù)生長發(fā)育不同階段Gh

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