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1、Ghrelin是生長(zhǎng)素促泌物受體(growthhormonesecretagaguereceptor,GHS-R)的內(nèi)源性配體,是目前為止除了生長(zhǎng)激素釋放激素和生長(zhǎng)抑素外,第三個(gè)調(diào)節(jié)GH分泌的內(nèi)源性物質(zhì)。哺乳類的Ghrelin促進(jìn)生長(zhǎng)激素的釋放,提高動(dòng)物的食欲;特別在能量平衡等生理過程中起重要的調(diào)節(jié)作用,成為近年來備受關(guān)注的腦腸肽。 目前關(guān)于Ghrelin在禽類方面的研究較少,貴州竹鄉(xiāng)烏骨雞Ghrelin與其生長(zhǎng)和攝食調(diào)控等之間
2、的關(guān)系還不清楚。本研究應(yīng)用PCR、RT-PCR等技術(shù)對(duì)Ghrelin基因的結(jié)構(gòu)、原核表達(dá)及生理活性進(jìn)行了研究。在克隆了Ghrelin基因和cDNA的基礎(chǔ)上,成功構(gòu)建了Ghrelin的原核表達(dá)質(zhì)粒,獲得原核表達(dá)菌株ER2566/PTYB11/G,經(jīng)優(yōu)化,該菌株在37℃,OD600=0.5,誘導(dǎo)5小時(shí)的表達(dá)量最高,融合蛋白的表達(dá)量占菌體總蛋白的40%,經(jīng)親和層析純化了融合蛋白。以純化的融合蛋白和人工合成的Ghrelin-KLH為抗原,制備了
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