腸桿菌科的細(xì)菌

1、第八章 腸桿菌科,倪語星,第一節(jié) 概述第二節(jié) 埃希菌屬第三節(jié) 沙門菌屬第四節(jié) 志賀菌屬第五節(jié) 耶爾森菌屬第六節(jié) 枸櫞酸桿菌屬第七節(jié) 克雷伯菌屬第八節(jié) 腸桿菌屬、泛菌屬、哈夫尼亞菌屬第九節(jié) 沙雷菌屬第十節(jié) 變形桿菌屬、普羅威登斯菌屬及摩根菌屬,一、分類二、細(xì)菌特性三、臨床意義四、鑒定原則,第一節(jié) 概述,返回,,,返回,,腸桿菌科的共同特性,1. 形態(tài)染色相似 革蘭陰性桿菌 2. 培養(yǎng)特

2、性相同 普通培養(yǎng)基上生長良好 3. 生化反應(yīng)活潑 發(fā)酵葡萄糖，氧化酶陰性，觸酶陽性，還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，O/F試驗為發(fā)酵型。4. 抗原構(gòu)造復(fù)雜5. 抵抗力弱 6. 易變異,返回,O-F試驗,氧化酶試驗陽性：紫紅色 陰性：無色,硝酸鹽還原試驗陽性：紅色 陰性：淡黃色,腸桿菌科細(xì)菌抗原模式圖,,,返回,致病物質(zhì)所致疾病,臨床意義,返回,菌毛或菌毛樣結(jié)構(gòu)莢膜或微莢膜外膜蛋白內(nèi)毒素

3、外毒素,致病物質(zhì),所致疾病,腸道感染 腹瀉、食物中毒、腸熱癥腸道外感染 鼠疫（烈性傳染?。?、泌尿道感染、 肺炎、腦膜炎、傷口化膿、菌血癥,返回,鑒定原則,1. 科間鑒別 2. 將腸桿菌科分為三大類3. 屬、種、群、型的區(qū)分 4. 腸桿菌科細(xì)菌綜合鑒定流程,返回,腸桿菌科與其它革蘭陰性桿菌區(qū)別,苯丙氨酸脫氨酶試驗陽性：綠色 陰性：黃色,葡萄糖酸鹽

4、試驗陽性：黃綠色 陰性：藍(lán)色,返回,第二節(jié) 大腸埃希菌,一、分類二、細(xì)菌特性三、臨床意義四、微生物學(xué)檢驗,返回,細(xì)菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng)抗原結(jié)構(gòu),大腸埃希菌革蘭染色,大腸埃希菌電鏡圖,大腸埃希菌菌落特征（血平板）,大腸埃希菌菌落特征（MAC）,大腸埃希菌KIA（AA＋－）MIU（＋＋－）,大腸埃希菌IMViC試驗（＋＋－－）右側(cè)為對照（－－＋＋）,大腸埃希菌抗原結(jié)構(gòu),致病物質(zhì)所致疾病,臨床意義,

5、致病物質(zhì),侵襲力 菌毛、K抗原內(nèi)毒素腸毒素 耐熱腸毒素（ST） 不耐熱腸毒素（LT）,所致疾病,腸道外感染 泌尿道感染（最常見） 膽道感染、腹膜炎、肺炎 菌血癥、新生兒腦膜炎腸道感染 ETEC、EPEC、EIEC、 EHEC、Eag

6、gEC,（一）檢驗程序（二）標(biāo)本采集（三）檢驗方法（四）耐藥性 （五）結(jié)果分析與報告,微生物學(xué)檢驗,大腸埃希菌檢驗程序,檢驗方法,1.顯微鏡檢查 2.分離培養(yǎng) 3.鑒定 ETECEPECEIECEHECEaggEC,ST檢測（乳鼠灌胃試驗）,LT 檢測（ CHO細(xì)胞培養(yǎng)）,O157:H7菌落特征（MAC）,O157:H7菌落特征（山梨醇麥康凱瓊脂平板）,返回,第三節(jié) 沙門菌屬,一、分類二、細(xì)菌特性三、臨床意義

7、四、微生物學(xué)檢驗,返回,,,細(xì)菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng)抗原結(jié)構(gòu),傷寒沙門菌革蘭染色,傷寒沙門菌菌落特征（MAC）,,,傷寒沙門菌菌落特征（SS）,傷寒沙門菌菌落特征（血平板）,傷寒沙門菌KIA（K A－＋）MIU（＋－－）,沙門菌IMViC試驗（－＋－－）,致病物質(zhì)所致疾病,臨床意義,致病物質(zhì),侵襲力 Vi-Ag 內(nèi)毒素 腸毒素,所致疾病,傷寒和副傷寒急性胃腸炎或食物中毒 菌血癥（或敗血癥）,（一）

8、檢驗程序（二）標(biāo)本采集（三）檢驗方法（四）耐藥性 （五）結(jié)果分析與報告,微生物學(xué)檢驗,沙門菌檢驗程序,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,、,,,,,,,,,,,,,檢驗方法,1.顯微鏡檢查 2.分離培養(yǎng) 3.鑒定4.血清學(xué)診斷,,沙門菌血清學(xué)鑒定,肥達(dá)反應(yīng)(Widal test),O凝集（1:20～1:1280，效價1:80）,H凝集（1:20～1:1280，效價1:320）,返回,第四節(jié) 志賀菌屬,一、分

9、類二、細(xì)菌特性三、臨床意義四、微生物學(xué)檢驗,返回,志賀菌屬分為A、B、C、D 4群：A群為痢疾志賀菌（S. dysenteriae），B群為福氏志賀菌（S. flexneri），C群為鮑氏志賀菌（S. boydii），D群為宋內(nèi)志賀菌（S. sonnei）。 在1989年CDC分類系統(tǒng)中將生化特征相近的A、B、C群歸為一群，統(tǒng)稱為志賀菌A、B、C血清群；而將生化特性與之相異，即鳥氨酸脫羧酶和?-半乳糖苷酶均為陽性

10、的宋內(nèi)志賀菌單列一類。,細(xì)菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng)抗原結(jié)構(gòu),志賀菌革蘭染色,志賀菌菌落特征(MAC),志賀菌KIA（K A－－）MIU（－－－）,志賀菌IMViC試驗（－＋－－）,致病物質(zhì)所致疾病,臨床意義,致病物質(zhì),侵襲力 菌毛內(nèi)毒素外毒素 志賀毒素,所致疾病,急性細(xì)菌性痢疾慢性菌痢帶菌者,（一）檢驗程序（二）標(biāo)本采集（三）檢驗方法（四）耐藥性 （五）結(jié)果分析與報告,微生物學(xué)檢驗,志賀菌檢驗程序,,

11、,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,在抗生素使用前采集新鮮糞便中膿、血、黏液部分，床邊接種或立即送檢，不能及時接種者可用卡-布運(yùn)送培養(yǎng)基送檢，昏迷不能排便病人可用肛拭取樣。,返回,第五節(jié) 耶爾森菌屬,一、分類二、鼠疫耶爾森菌三、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌四、其他耶爾森菌,返回,其他尚有： 假結(jié)核耶爾森菌（Y.pseudotuberculosis） 奧氏耶爾森菌（Y.aldouae）

12、 伯氏耶爾森菌（Y.bercovieri） 弗氏耶爾森菌（Y.frederiksenii） 中間耶爾森菌（Y.intermedia）等9種耶爾森菌。 均可從臨床標(biāo)本中分離得到，其相互之間的生化性狀相似，均能在4℃以及在CIN上生長，可在冷凍食品中增殖，并具有潛在的致病性。,鼠疫耶爾森菌,（一）細(xì)菌特性（二）臨床意義（三）微生物學(xué)檢驗,細(xì)菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng),鼠疫耶爾森菌鏡下形態(tài)（W

13、ayson染色）,鼠疫耶爾森菌菌落特征（MAC）,致病物質(zhì)所致疾病,臨床意義,致病物質(zhì),侵襲力 FI抗原（封套抗原） V/W抗原（毒力抗原）內(nèi)毒素鼠毒素,所致疾病,甲類烈性傳染病——鼠疫常見臨床類型：腺鼠疫 敗血型鼠疫肺鼠疫,（一）檢驗程序（二）標(biāo)本采集（三）檢驗方法（四）結(jié)果分析與報告,微生物學(xué)檢驗,一旦疑為本菌，應(yīng)立即向本地區(qū)疾病控制中心等部門報告，并將菌種送檢驗中心或?qū)I(yè)實

14、驗室作進(jìn)一步鑒定。診斷確立后除對患者進(jìn)行隔離治療外，對疫區(qū)及有關(guān)人員須采取有效的預(yù)防隔離措施，防止疫情擴(kuò)散。,鼠疫耶爾森菌檢驗程序,標(biāo)本采集,1. 臨床標(biāo)本 淋巴結(jié)穿刺液、血液或痰標(biāo)本2. 非臨床標(biāo)本 尸檢取病變組織，鼠標(biāo)本應(yīng)嚴(yán)格消毒體表，再進(jìn)行采集,返回,小腸結(jié)腸炎耶爾森菌,（一）細(xì)菌特性（二）臨床意義（三）微生物學(xué)檢驗,細(xì)菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng),小腸結(jié)腸炎耶爾森菌革蘭染色,小腸結(jié)腸炎耶爾森菌菌落特征（MAC）

15、,小腸結(jié)腸炎耶爾森菌菌落特征（CIN瓊脂平板),致病物質(zhì) 侵襲力 腸毒素所致疾病 小腸炎、結(jié)腸炎、膽囊炎 腹膜炎、菌血癥,臨床意義,小腸結(jié)腸炎耶爾森菌檢驗程序,KIA：AA--或KA-- 枸櫞酸鹽（-） 脲酶（+） 吲哚（-/+） 鳥氨酸脫羧酶（+） 動力、V-P反應(yīng)結(jié)果與孵育溫度有關(guān)（22℃～25℃陽性，35℃～37℃陰性） 根據(jù)菌落特征，菌體形態(tài)染色特點(diǎn)、

16、嗜冷性及典型生化結(jié)果即可初步診斷本菌。,返回,第六節(jié) 枸櫞酸桿菌屬,一、分類二、細(xì)菌特性三、臨床意義四、微生物學(xué)檢驗,返回,,弗勞地枸櫞酸桿菌（C.freundii）異型枸櫞酸桿菌（C.diversus）無丙二酸鹽枸櫞酸桿菌（C.amalonaticus）,細(xì)菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng),弗勞地枸櫞酸桿菌菌落特征（MAC）,枸櫞酸桿菌IMViC (＋－＋＋),返回,第七節(jié) 克雷伯菌屬,一、分類二、細(xì)菌特性三

17、、臨床意義四、微生物學(xué)檢驗,返回,,肺炎克雷伯菌（K.pneumoniae） 產(chǎn)酸（催娩）克雷伯菌（K.axytoca） 解鳥氨酸克雷伯菌（K.ornithinolytica） 植生克雷伯菌（K.planticola） 土生克雷伯菌（K.terrigena）肺炎克雷伯菌又可分為3個亞種： 肺炎克雷伯菌肺炎亞種（subsp. pneumoniae）

18、 肺炎克雷伯菌臭鼻亞種（subsp. ozaenae） 肺炎克雷伯菌鼻硬結(jié)亞種（subsp. rhinoscleromatis）,返回,細(xì)菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng),肺炎克雷伯菌革蘭染色,肺炎克雷伯菌電鏡圖,肺炎克雷伯菌莢膜染色,肺炎克雷伯菌的菌落特征（血瓊脂平板）,肺炎克雷伯菌的菌落特征（MAC）,肺炎克雷伯菌粘絲試驗,肺炎克雷伯菌KIA（A A＋＋ ）、MIU（－－＋）,肺炎克雷伯菌IMViC試驗（－－＋

19、＋）,克雷伯菌屬的細(xì)菌多感染免疫力低下的人群，是醫(yī)院感染中最重要的條件致病菌。所致疾?。悍窝?、腦膜炎、腹膜炎、泌尿系統(tǒng)感染、敗血癥,臨床意義,（一）檢驗程序（二）標(biāo)本采集（三）檢驗方法（四）耐藥性 （五）結(jié)果分析與報告,微生物學(xué)檢驗,肺炎克雷伯菌易產(chǎn)生超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBL），近年來文獻(xiàn)報道我國產(chǎn)酶率已達(dá)30%左右，產(chǎn)酶株對青霉素類、第1、2、3代頭孢菌素及單環(huán)β-內(nèi)酰胺類抗生素均產(chǎn)生耐藥，而僅對頭霉素類、碳青霉烯類及酶

20、抑制劑敏感。ESBL檢測現(xiàn)已作為醫(yī)院細(xì)菌室常規(guī)檢測項目。,肺炎克雷伯菌檢驗程序,檢驗方法,1.顯微鏡檢查 2.分離培養(yǎng) 3.鑒定,肺炎克雷伯菌莢膜腫脹試驗,返回,第八節(jié) 腸桿菌屬,一、分類二、細(xì)菌特性三、臨床意義四、微生物學(xué)檢驗,返回,產(chǎn)氣腸桿菌（E.aerogenes） 陰溝腸桿菌 （E.cloacea） 日勾維腸桿菌（E.gergoviae） 阪崎腸桿菌（E.sakazakii） 中間型腸桿菌（E

21、.intermedium） 泰洛腸桿菌（E.taylorac） 河生腸桿菌（E.amnigenus） 阿氏腸桿菌（E.asburiac） 致癌腸桿菌（E.cancerogenus） 溶解腸桿菌（E.dissolvens） 超壓腸桿菌（E.nimipressualis）,細(xì)菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng),陰溝腸桿菌革蘭染色,陰溝腸桿菌菌落特征(MAC),產(chǎn)氣腸桿菌IMViC試驗（－－＋＋）,腸桿菌

22、屬是腸桿菌科中最常見的環(huán)境菌群，醫(yī)院感染的重要病原菌。在臨床微生物室檢出率最高的是陰溝腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌，可引起泌尿道感染、呼吸道感染、傷口感染以及敗血癥。,臨床意義,（一）檢驗程序（二）標(biāo)本采集（三）檢驗方法（四）耐藥性 （五）結(jié)果分析與報告,,IMViC試驗大腸埃希菌為++--腸桿菌屬細(xì)菌大多為--++動力和鳥氨酸脫羧酶試驗肺炎克雷伯菌為陰性腸桿菌屬多數(shù)為陽性,腸桿菌科細(xì)菌常產(chǎn)生AmpC酶，尤以陰溝腸桿菌最為突出。

23、它是導(dǎo)致革蘭陰性菌尤其是陰溝腸桿菌對1～3代頭孢菌素、單環(huán)β-內(nèi)酰胺類、頭霉素類及含酶抑制劑的復(fù)合制劑耐藥的重要原因。 產(chǎn)AmpC酶細(xì)菌的治療，首選4代頭孢（頭孢吡肟）和碳青霉烯類抗生素。近年來已有質(zhì)粒介導(dǎo)的AmpC酶出現(xiàn)。,返回,泛菌屬與哈夫尼亞菌屬,一、泛菌屬（一）分類（二）細(xì)菌特性（三）臨床意義（四）微生物學(xué)檢驗二、哈夫尼亞菌屬（一）分類（二）細(xì)菌特性（三）臨床意義（四）微生物學(xué)檢驗,返回,聚

24、團(tuán)泛菌（P.agglomerans） 彌散泛菌（P.dispersa）聚團(tuán)泛菌包括以前的典型聚團(tuán)腸桿菌、草生歐文氏菌和雞血藤歐文氏菌。,聚團(tuán)泛菌菌落特征（普通瓊脂）,蜂房哈夫尼亞菌菌落特征（MAC）,返回,第九節(jié) 沙雷菌屬,一、分類二、細(xì)菌特性三、臨床意義四、微生物學(xué)檢驗,返回,粘質(zhì)沙雷菌（S.marcescens） 沙雷菌液化群（S.lique faciens group） 臭味沙雷菌（S.odorifera

25、） 普城沙雷菌（S.plymuthica） 深紅沙雷菌（S.rubidaea） 無花果沙雷菌（S.ficaria） 嗜蟲沙雷菌（S.entomophila） 居泉沙雷菌（S.fonticola）,粘質(zhì)沙雷菌菌落特征（普通瓊脂平板）,粘質(zhì)沙雷菌、液化沙雷菌和深紅沙雷菌都是已證實的條件致病菌，其中粘質(zhì)沙雷菌是醫(yī)院感染的重要條件致病菌之一，是引起腸道外感染的主要病原菌，可導(dǎo)致肺部感染、腦膜炎、心內(nèi)膜炎、泌尿道感染、敗血癥、

26、輸血和外科手術(shù)后感染等。,返回,第十節(jié) 變形桿菌屬、普羅威登斯菌屬、摩根菌屬,一、變形桿菌屬二、普羅威登斯菌屬三、摩根菌屬,返回,一、變形桿菌屬,（一）分類（二）細(xì)菌特性（三）臨床意義（四）微生物學(xué)檢驗,返回,細(xì)菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng),變形桿菌革蘭染色,變形桿菌鞭毛染色,變形桿菌遷徙生長現(xiàn)象（普通瓊脂平板）,變形桿菌菌落特征（MAC）,變形桿菌KIA（K A+ + ）MIU（+ +/- +）,變形桿菌苯丙氨酸脫