耐碳青霉烯類的腸桿菌科細菌耐藥機制和院內(nèi)流行的研究.pdf

1、目的：
　　了解本院臨床分離的耐碳青霉烯類腸桿菌科細菌（CRE）的臨床分布和院內(nèi)感染情況，對出現(xiàn)爆發(fā)流行的病區(qū)進行 CRE耐藥機制的研究和流行病學描述。為掌握我院 CRE流行的一手資料，為針對性制定相應的防控措施提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　2015年至2016年在本院收集非重復CRE菌株55株。通過回顧性分析其臨床分布特征和耐藥譜，使用改良 Hodge試驗檢測其是否產(chǎn)碳青霉烯酶；使用 PCR引物擴增并通過采用雙脫氧

2、鏈終止法測序驗證耐藥基因；對MHT試驗和PCR檢測碳青霉烯酶的結(jié)果符合程度使用四格表配對T檢驗和κ系數(shù)分析進行統(tǒng)計學檢驗；對其中出現(xiàn)發(fā)生爆發(fā)流行的病區(qū)的CRE菌株，使用ERIC-PCR和MLST分型技術(shù)研究各個菌株之間的同源性；使用質(zhì)粒接合試驗研究其耐藥基因擴散機制；PBRT技術(shù)研究其質(zhì)粒的同源性。
　　結(jié)果：
　　對全院兩年收集的CRE菌株分析發(fā)現(xiàn)：本院CRE菌株以肺炎克雷伯菌和陰溝腸桿菌為主。主要檢出科室為新生兒科。標本

3、類型以痰、尿為主。分離出CRE的主要患者為新生兒和＞60歲的老年患者。平均住院時間41天。大部分患者能通過治療達到好轉(zhuǎn)甚至治愈。2015年檢出CRE9株，主要集中在第二季度。2016年檢出CRE36株，主要集中在第四季度。β內(nèi)酰胺類耐抗生素藥率＞95％。喹諾酮類和氨基糖苷類抗生素的耐藥率＜60%。甲氧芐啶/磺胺甲噁唑的耐藥率＞80%。MHT試驗陽性率90.9%。碳青霉烯酶基因擴增以NDM為主，KPC、VIM、IMP陽性菌株各1株，另有1

4、0株CRE未檢出碳青霉烯酶基因。ESBLs基因擴增結(jié)果為TEM陽性47株，SHV陽性44株?？梢苿有曰蛟U增IntI陽性40株。MHT試驗和PCR擴增試驗比較，McNemar檢驗結(jié)果為P=0.063，κ一致性系數(shù)為0.621，P＜0.001，表明兩種檢驗方法在檢測碳青霉烯酶上存在一致性。對新生兒病區(qū)收集的35株CRE分析發(fā)現(xiàn)：新生兒病區(qū)檢出CRE為陰溝腸桿菌和肺炎克雷伯菌。臨床診斷以新生兒肺炎為主。70.6%的CRE引起感染。上半年

5、主要檢出陰溝腸桿菌，下半年僅檢出肺炎克雷伯菌。本病區(qū)CRE對β內(nèi)酰胺類抗生素耐藥率＞95%，喹諾酮類抗生素的耐藥率為0%。氨基糖胺類抗生素耐藥率＜4%，與全院的結(jié)果明顯不同。所有菌株均NDM和TEM和Int I陽性，SHV陽性34株（C5陰性）。ERIC電泳顯示陰溝腸桿菌屬于同一個組，MLST分型ST757。則肺炎克雷伯菌可以分為三個組，分別歸屬為ST105，ST347和ST1547，并以ST1547型菌株為主。NDM基因成功地從35株

6、CRE菌株上轉(zhuǎn)移至大腸埃希菌J53上，并表現(xiàn)出耐碳青霉烯類的性狀。所有CRE和接合菌株均檢出IncP質(zhì)粒。
　　結(jié)論：
　?、欧窝卓死撞完帨夏c桿菌是本院的主要流行菌株；⑵患者普遍身體狀況差；⑶本院CRE感染大部分病人治療效果較好；⑷本院CRE主要碳青霉烯酶為NDM型酶；⑸MHT試驗和PCR耐藥基因擴增結(jié)果一致性程度較高，兩種方法可在實踐中結(jié)合使用，發(fā)揮各自優(yōu)點；⑹新生兒病區(qū)2016年出現(xiàn)CRE的垂直傳播和水平傳播，傳播方