耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌分子流行病學(xué)及耐藥機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究我院耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌（CRAB）對(duì)碳青霉烯類耐藥的分子機(jī)制，并通過分子流行病學(xué)研究探討我院CRAB的分離率迅速上升的原因。
　　 方法：收集我院2009年5月分離的非重復(fù)耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌30株，采用脈沖場凝膠電泳（PFGE）技術(shù)分析它們的同源性，應(yīng)用多位點(diǎn)序列分型（MLST）技術(shù)明確各克隆株的ST型。篩查各種β-內(nèi)酰胺酶（主要是碳青霉烯類水解酶）：表型篩查；基因型篩查——DNA擴(kuò)增、測(cè)序（各種金屬β內(nèi)酰

2、胺酶如IPM、VIM、SIM等；能夠水解碳青霉烯類抗生素的D類β內(nèi)酰胺酶如OXA-23、OXA-24、OXA-58、OXA-51等； AmpC酶等）。PCR篩查Ⅰ類整合子和插入序列ISAba1。
　　 結(jié)果：PFGE顯示我院CRAB存在兩個(gè)克隆，分為A、B型，2009年5月分離的30株非重復(fù)CRAB中，有19株屬于克隆株A，11株屬于克隆株B，克隆株A和克隆株B均廣泛分布于各科室，創(chuàng)傷外科、ICU、呼吸內(nèi)科等科室同時(shí)存在兩個(gè)CR

3、AB克隆。MLST結(jié)果顯示，克隆株A屬于ST91，克隆株B屬于ST90，ST91同時(shí)攜帶blaOXA-23和blaOXA-58，而ST90只攜帶blaOXA-23。11株ST90克隆株均檢出整合酶基因intⅠ1，而19株ST91克隆株未擴(kuò)增出整合酶基因。所有菌株blaOXA-23、blaOXA51基因的上游均發(fā)現(xiàn)有ISaba1,9株ST90克隆株blaAmpC的上游發(fā)現(xiàn)插入序列ISaba1。金屬酶表型實(shí)驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)陽性，PCR未擴(kuò)增出IMP

4、、VIM、SIM等金屬β-內(nèi)酰胺酶基因。
　　 結(jié)論：我院同時(shí)存在兩個(gè)不同遺傳背景的CRAB克隆在科室間傳播，臨床應(yīng)予以重視。插入序列ISAba1介導(dǎo)blaOXA-23是我院鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類耐藥的主要分子機(jī)制。兩個(gè)CRAB克隆可能是由相應(yīng)ST型的敏感株獨(dú)立進(jìn)化而來，在應(yīng)對(duì)抗生素選擇性壓力時(shí)各有優(yōu)勢(shì)，ST91同時(shí)攜帶blaOXA-23和blaOXA-58，ST90攜帶blaOXA-23，且存在插入序列ISAba1介導(dǎo)bla