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1、目的:調(diào)查該院2007年9月至2009年9月間暴發(fā)流行的77株鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類抗生素的耐藥機(jī)制,重點(diǎn)探討D類β內(nèi)酰胺酶編碼基因及其上游插入序列IS對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌亞胺培南耐藥的影響。同時(shí)進(jìn)行分子流行病學(xué)調(diào)查。
方法:通過PCR檢測(cè)blaOXA-51-like基因的方法從鮑曼不動(dòng)桿菌復(fù)合體中鑒定出鮑曼不動(dòng)桿菌;采用AST-GN09藥敏卡,通過Vitek2compact系統(tǒng)對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn);通過PCR方法檢測(cè)7
2、7株鮑曼不動(dòng)桿菌內(nèi)blaVIM、blaIMP、blaSIM和blaNDM-1等金屬β內(nèi)酰胺酶編碼基因,以及blaOXA-23-like、blaOXA-24-like、blaOXA-51-like和blaOXA-58-like等D類苯唑西林酶編碼基因,并對(duì)其上游插入序列ISAba1進(jìn)行檢測(cè);采用脈沖場(chǎng)凝膠電泳(PFGE)、多位點(diǎn)序列分型(MLST)和國際克隆分型等方法進(jìn)行分子流行病學(xué)調(diào)查。
結(jié)果:
1.77株鮑
3、曼不動(dòng)桿菌中有57株對(duì)亞胺培南耐藥,3株對(duì)亞胺培南中度敏感,17株對(duì)亞胺培南敏感;
2.所有菌株內(nèi)均未檢測(cè)到各類金屬β內(nèi)酰胺酶編碼基因;57株亞胺培南耐藥菌株中均檢測(cè)到blaOXA-23-like類基因,且在其上游均檢測(cè)到ISAbal插入序列;20株亞胺培南非耐藥菌株中僅有兩株檢出blaOXA-58-like基因,且該兩株鮑曼不動(dòng)桿菌blaOXA-51-like上游檢測(cè)出了ISAba1。77株菌中均未檢測(cè)到blaOXA-2
4、4-like基因。
3.PFGE分型結(jié)果顯示:77株鮑曼不動(dòng)桿菌分屬A-F6種克隆型別,A克隆和B克隆為本次PFGE分型主要克隆型別。其中,A克隆共有4種亞克隆,共包括30株菌株;B克隆共有5種亞克隆,共包括37株菌株。
4.從六種PFGE克隆型別的每一型別中分別選取1株代表菌株進(jìn)行MLST分型,共鑒定出ST75(A克隆)、ST137(B克隆)以及ST17(E克?。┑刃蛣e;同時(shí),新發(fā)現(xiàn)了兩種ST型別: STN
5、1(C及F克?。┖蚐T N2(D克?。?。
5.歐洲克隆分型結(jié)果顯示:本次調(diào)查菌株中ST75(A克?。TN1(C及F克?。儆跉W洲克隆Ⅱ型菌株。
結(jié)論:引起本次院感爆發(fā)的77株鮑曼不動(dòng)桿菌多為亞胺培南耐藥菌株(74%,57/77),主要克隆為A克隆(ST75、歐洲克隆Ⅱ型)與B克隆(ST137),且其對(duì)臨床常用碳青霉烯類抗生素亞胺培南的耐藥多與blaOXA-23-like基因及其上游插入序列ISAba1的出
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