寧夏地區(qū)耐碳青霉烯類藥物腸桿菌科細(xì)菌耐藥性研究及同源性分析.pdf

1、目的：研究本院耐碳青霉烯類藥物腸桿菌科細(xì)菌的臨床分布、耐藥情況、耐藥基因型及其同源性，為本院抗菌藥物的合理使用及院內(nèi)感染監(jiān)測(cè)等方面提供有效的科學(xué)指導(dǎo)。
　　方法：利用WHONET5.6軟件統(tǒng)計(jì)2011年1月至2013年12月本院分離的腸桿菌科細(xì)菌的標(biāo)本類型、科室分布和耐藥性，同時(shí)篩查同期分離的耐碳青霉烯的腸桿菌科細(xì)菌，對(duì)篩查陽性菌株，通過超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（Extended-spectrum beta-lactamase，ESBL

2、）表型確證實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇異變形桿菌是否產(chǎn)ESBL，通過頭孢西丁三維實(shí)驗(yàn)監(jiān)測(cè)是否產(chǎn)AmpC酶，通過改良Hodge實(shí)驗(yàn)檢測(cè)是否產(chǎn)碳青霉烯酶，通過EDTA協(xié)同抑制試驗(yàn)檢測(cè)是否產(chǎn)金屬酶；通過PCR擴(kuò)增常見的耐藥基因（ESBL、AmpC酶基因、碳青霉烯酶基因、喹諾酮類耐藥基因及整合子基因）；通過質(zhì)粒接合實(shí)驗(yàn)探討是否可通過接合的方式傳遞耐藥質(zhì)粒；通過PFGE（Pulsed field gel electropHoresis）和

3、ERIC-PCR（Enterobacterial repetitive intergenic consensusPCR）探討耐碳青霉烯的陰溝腸桿菌是否具有同源性。
　　結(jié)果：近三年本院共分離到7315株腸桿菌科細(xì)菌，其中主要以痰液及咽拭子（46.6％）、膿液及分泌物（13.9%）和尿液（13.0%）等標(biāo)本為主，科室主要以兒科（17.5%）、呼吸內(nèi)科（7.1%）和重癥監(jiān)護(hù)室（6.4%）為主，菌株主要為大腸埃希菌（40.6%）、肺炎克

4、雷伯菌（32.0%）和陰溝腸桿菌（15.3%）；多數(shù)藥物耐藥率較高，僅碳青霉烯類、酶抑制劑類和氨基糖苷類保持著較高的敏感性。同時(shí)共篩查到18株耐碳青霉烯的腸桿菌科細(xì)菌，其中陰溝腸桿菌10株，奇異變形桿菌3株，肺炎克雷伯菌2株，大腸埃希菌、產(chǎn)氣腸桿菌和弗勞地枸櫞酸桿菌各1株；ESBL表型確證試驗(yàn)陽性率為66.7%（4/6），AmpC酶陽性率為55.6%（10/18），改良Hodge實(shí)驗(yàn)陽性率為72.2%（13/18），EDTA協(xié)同抑制試驗(yàn)

5、陽性率為44.4%（8/18）；耐藥基因擴(kuò)增結(jié)果中，ESBL基因陽性率為66.7%（只要產(chǎn)生任意一種ESBL基因即判為陽性，下同），AmpC酶耐藥基因陽性率為55.6%，碳青霉烯酶耐藥基因陽性率為77.8%，喹諾酮類耐藥基因陽性率為77.8%，I類整合子陽性率為88.9%（16/18），II類整合子陽性率為11.1%（2/18），ISCR（Insertion sequence common region）陽性率為72.2%（13/18）

6、；質(zhì)粒接合實(shí)驗(yàn)的陽性率為66.7%（12/18），且接合子的MIC遠(yuǎn)低于供體菌的MIC；PFGE和ERIC-PCR同源性分析具有較高的一致性，同時(shí)表明本院并未存在感染菌株的暴發(fā)流行，均為散在分布。
　　結(jié)論：本院腸桿菌科細(xì)菌耐藥率較高，其中耐碳青霉烯的腸桿菌科細(xì)菌主要為陰溝腸桿菌，耐碳青霉烯的腸桿菌科細(xì)菌可攜帶多種耐藥基因，其中碳青霉烯酶基因以NDM-1和KPC-2為主，且耐藥菌株可將耐藥質(zhì)粒傳遞給敏感菌株；本院耐碳青霉烯的陰溝腸