耐碳青霉烯類(lèi)肺炎克雷伯菌的耐藥性及同源性研究.pdf

1、研究背景：
　　肺炎克雷伯菌是革蘭陰性兼性厭氧桿菌，是臨床細(xì)菌分離培養(yǎng)最為常見(jiàn)的條件致病菌之一。但是由于廣譜青霉素類(lèi)、第三代頭孢菌素、單環(huán)類(lèi)、β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的復(fù)合制劑及喹諾酮類(lèi)等廣譜抗生素在臨床治療肺炎克雷伯菌感染患者中的大量使用，肺炎克雷伯菌能夠產(chǎn)生超廣譜內(nèi)酰胺酶(ESBLs)和頭孢菌素酶(AmpC酶)等從而對(duì)廣譜類(lèi)抗生素表現(xiàn)出多重耐藥性。碳青霉烯類(lèi)是β-內(nèi)酰胺類(lèi)，是臨床治療ESBLs及AmpC酶等腸桿菌科細(xì)菌感染患者的一類(lèi)

2、廣譜抗生素。然而，伴隨著碳青霉烯類(lèi)抗生素在臨床大量的使用，對(duì)碳青霉烯類(lèi)抗生素耐藥的腸桿菌科以及不動(dòng)桿菌屬也在逐漸上升，給臨床治療帶來(lái)了嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。其中，耐碳青霉烯類(lèi)抗生素的主要機(jī)制就是細(xì)菌產(chǎn)生碳青霉烯酶。碳青霉烯酶是指能夠水解青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)、碳青霉烯類(lèi)以及β-內(nèi)酰胺酶抑制劑、氨基糖苷類(lèi)、喹諾酮類(lèi)等多種抗菌藥物的一大類(lèi)β-內(nèi)酰胺酶，能大大降低藥物的作用效果甚至消失。碳青霉烯酶大都由質(zhì)粒介導(dǎo)，具有廣泛的傳播性。
　　本研究對(duì)廣州軍

3、區(qū)廣州總醫(yī)院收集的53株耐碳青霉烯類(lèi)肺炎克雷伯菌（CRKP）進(jìn)行了菌種鑒定以及藥敏試驗(yàn)，并對(duì)其耐藥譜以及耐藥表型進(jìn)行了研究，檢測(cè)碳青霉烯酶基因以及進(jìn)行了脈沖場(chǎng)凝膠電泳(PFGE)和多位點(diǎn)序列分型(MLST)，并且制定了調(diào)查表進(jìn)行臨床病例資料收集以及整理。為我院臨床抗生素的合理使用及采取防治措施提供信息參考。
　　研究方法：
　　收集2015年7月到2016年7月自51名患者分離出53株CRKP; VITEK-2全自動(dòng)微生物儀

4、器以及MALDI-TOF MS對(duì)CRKP進(jìn)行鑒定及藥敏試驗(yàn)，并同時(shí)使用K-B法以及E-test法進(jìn)行確認(rèn);采用改良Hodge試驗(yàn)(MHT)和EDTA試驗(yàn)進(jìn)行碳青霉烯酶表型實(shí)驗(yàn);PCR檢測(cè)常見(jiàn)碳青霉烯酶基因KPC、VIM、IMP、NDM-1、OXA-48基因，并進(jìn)行測(cè)序以及亞型的確定;PFGE和PLST兩種技術(shù)進(jìn)行同源性研究。
　　研究結(jié)果：
　　53株菌株均為碳青霉烯類(lèi)耐藥;MHT52株陽(yáng)性，EDTA均為陰性;52株CRKP

5、攜帶KPC-2，僅有1株細(xì)菌攜帶IMP-4，未發(fā)現(xiàn)VIM、NDM-1、OXA-48基因;經(jīng)PFGE分為Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型4種不同類(lèi)型;PFGE的Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型耐碳青霉烯類(lèi)肺炎克雷伯菌株屬于ST11;16號(hào)為Ⅳ型屬于ST16;本次研究VITEK MS鑒定出來(lái)的CRKP包括粘液型在內(nèi)菌株鑒定分值Vitek≥90％，結(jié)果高度可信且與MLST分型的結(jié)果高度相符。
　　結(jié)論：
　　本次研究，53株耐碳青霉烯類(lèi)肺炎克雷伯菌主要耐藥