肺炎克雷伯菌臨床分離株的耐藥性及耐藥基因分析.pdf

1、目的：
　　對本市一家綜合性醫(yī)院近兩年臨床分離出的肺炎克雷伯菌的臨床分布和耐藥性進行分析，研究AmpC酶及碳青霉烯酶的基因型。
　　方法：
　　分析本市一家綜合性醫(yī)院2013年1月-2014年12月臨床分離的無重復(fù)的747株肺炎克雷伯菌，對臨床分離出的肺炎克雷伯菌采用VITEK-2全自動微生物分析儀進行菌種鑒定；分離出的產(chǎn)ESBLs菌株采用美國臨床實驗室標準化協(xié)會（CLSI）推薦的ESBLs篩選和表型確證試驗進行操作；

2、采用K-B紙片瓊脂擴散法對所測細菌進行藥敏試驗，用WHONET5.6軟件進行數(shù)據(jù)分析。對于用頭孢西丁初篩試驗測得的205株產(chǎn)AmpC酶肺炎克雷伯菌，采用改良三維試驗檢測AmpC酶，用聚合酶鏈（PCR）反應(yīng)，確定AmpC酶的基因型。采用K-B法藥敏試驗篩選出的10株耐碳青霉烯的肺炎克雷伯菌，用改良Hodge試驗檢測這些菌株產(chǎn)碳青霉烯酶的表型，用聚合酶鏈（PCR）反應(yīng)，確定碳青霉烯酶的基因型。
　　結(jié)果：
　　2013年1月至2

3、014年12月臨床共分離出肺炎克雷伯菌747株，其中臨床分布前3位的科室分別為呼吸內(nèi)科（42.4％)，重癥醫(yī)學(xué)科(21.7%)，泌尿外科(8.2%)，標本的來源均以痰液中的構(gòu)成比最高。本研究中的747株肺炎克雷伯菌中通過產(chǎn)ESBLs菌株篩選試驗有317株產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs)，通過表型確證試驗317株（100%）均為產(chǎn)ESBLs株；747株肺炎克雷伯菌中共分離出430株非產(chǎn)ESBLs的肺炎克雷伯菌。藥敏結(jié)果顯示：本分析中抗菌

4、藥物的耐藥率比較，產(chǎn) ESBLs的耐藥率高于非產(chǎn) ESBLs。產(chǎn) ESBLs菌株對阿米卡星、左氧氟沙星、亞胺培南、美羅培南和β-內(nèi)酰胺酶抑制劑類藥物耐藥率均較低分別為17.4%、20.1%、0、0、34.3%，而對頭孢呋辛、頭孢曲松、頭孢他啶和頭孢噻肟等二、三代頭孢類抗菌藥物的耐藥率均高于80%，分別為89.4%、88.9%、83.7%、88.9%。產(chǎn)ESBLs菌株與非產(chǎn)ESBLs菌株對阿米卡星、亞胺培南、美羅培南、氨芐西林的耐藥率的差

5、異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），而對其他16種抗菌藥物的耐藥率的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。由初篩試驗篩選出的205株產(chǎn) AmpC酶的肺炎克雷伯菌通過改良三維試驗測得58株為 AmpC酶菌株，經(jīng)PCR擴增這58株均為產(chǎn)AmpC酶。本研究檢測出10株耐碳青霉烯的肺炎克雷伯菌，這些菌株除對阿米卡星敏感外，對其他藥物均耐藥；用改良 Hodge試驗檢測有9株肺炎克雷伯菌均產(chǎn)碳青霉烯酶，經(jīng)PCR擴增顯示這9株為產(chǎn)KPC基因型。
　　結(jié)