肺炎克雷伯菌臨床分離株的耐藥性及產(chǎn)ESBLs的基因型分析.pdf

1、目的：
　　研究河南地區(qū)肺炎克雷伯菌臨床分離株的耐藥性以及分析臨床分離產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶( ESBLs)肺炎克雷伯菌中基因型的分布及藥敏情況。
　　方法：
　　收集2012年1月-2013年12月臨床分離的無重復(fù)的650株肺炎克雷伯菌，對(duì)分離的肺炎克雷伯菌用Vitek-2全自動(dòng)微生物分析儀進(jìn)行菌種鑒定；藥敏采用K-B紙片擴(kuò)散法, WHONET5.6軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，ESBLs菌株的篩選及確證采用美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委

2、員會(huì)(CLSI)推薦的表型確認(rèn)方法進(jìn)行。藥敏試驗(yàn)篩選出6株耐碳青霉烯類抗菌藥物的肺炎克雷伯菌（CRKP）,改良Hodge試驗(yàn)檢測(cè)菌株產(chǎn)碳青霉烯酶的表型，用乙二胺四乙酸（EDTA）紙條法檢測(cè)金屬酶表型。采用聚合酶鏈（ PCR）反應(yīng)，用引物對(duì)260株產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌株的ESBLs基因（blaTEM、blaSHV和blaCTX-M）進(jìn)行PCR擴(kuò)增，分析產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的耐藥性及ESBLs的基因表型情況。
　　結(jié)果：

3、>　　共分離出肺炎克雷伯菌650株,臨床分布前3位的科室分別為呼吸科(45.7％),重癥監(jiān)護(hù)(22.8％)和泌尿外科(7.1％),標(biāo)本分布以痰液的構(gòu)成比最高。650株肺炎克雷伯菌中產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶ESBLs菌株篩選試驗(yàn)初步篩出260株，通過進(jìn)一步確認(rèn)試驗(yàn)260株均確認(rèn)為產(chǎn)ESBLs菌,非產(chǎn)ESBLs的肺炎克雷伯菌390株。650株肺炎克雷伯菌對(duì)25種抗菌藥物耐藥率在0.7%～100%，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對(duì)常用抗菌藥物耐藥率普遍

4、高于非產(chǎn)ESBLs。產(chǎn)ESBLs株對(duì)亞胺培南、美羅培南、左氧氟沙星、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦和阿莫西林/克拉維酸耐藥率較低，而對(duì)頭孢呋辛、頭孢曲松、頭孢他啶和頭孢噻肟耐藥率高達(dá)80%以上。除阿米卡星、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、亞胺培南、美羅培南、氨曲南外，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌株與非產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌株對(duì)其他19種抗生素的耐藥率不同（P＜0.01）。檢測(cè)出的6株CRKP對(duì)阿米卡星和替加環(huán)素敏感外，對(duì)其余23種藥物均耐藥；改良Ho

5、dge試驗(yàn)證實(shí)5株CRKP均產(chǎn)碳青霉烯酶，EDTA紙條法檢測(cè)顯示1株產(chǎn)金屬酶。260株產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌株中有105株（40.4%）檢測(cè)到blaSHV，120株（46.2%）檢測(cè)到blaTEM，140株（53.8%）檢測(cè)到blaCTX-M。
　　結(jié)論：
　　肺炎克雷伯菌耐藥及多重耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重；產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌其耐藥性高于非產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌；本地區(qū)產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌臨床主要流行耐藥基因型是blaCT