革蘭陰性桿菌耐藥性及其產ESBLs基因型的研究.pdf

1、目的：調查蘭州大學第二醫(yī)院醫(yī)院感染革蘭陰性桿菌譜及其耐藥性，對經確認的產超廣譜β-內酰胺酶(Extended-spectrumbeta-lactamases，ESBLs)菌株進行耐藥基因分型。 方法：采用MicroScan-4和K-B法，對蘭州大學第二醫(yī)院2000年-2004年的院內感染革蘭陰性桿菌進行鑒定和藥物敏感試驗，檢測分離菌對16種抗生素的耐藥性，利用“whonet5.3”軟件對耐藥性結果進行錄入及分析。通過表型初篩法(

2、K-B)、表型確認法(K-B)、三維試驗確認產ESBLs菌株，采用PCR對ESBLs基因進行分型。 結果：1、蘭州大學第二醫(yī)院革蘭陰性桿菌所致醫(yī)院感染中，大腸埃希菌比例最高，占34％，陰溝腸桿菌、不動桿菌比例呈上升趨勢。細菌的耐藥率在逐年上升，其中陰溝腸桿菌和鮑曼不動桿菌，耐藥性高于其它革蘭陰性桿菌(p＜0.05)，對第三代頭孢菌素耐藥率分別達到60-80％、40-70％，對亞胺培南耐藥的菌株日益增多，甚至出現了“全耐藥”的鮑曼

3、不動桿菌。敏感性較高的抗生素有丁胺卡那、派拉西林/他唑巴坦、亞胺培南。 2、本院2005年5月～9月從醫(yī)院感染臨床標本分離革蘭陰性桿菌175株中，檢出產ESBLs菌49株，分布于大腸埃氏希菌、克雷伯菌、陰溝腸桿菌、弗勞地枸椽桿菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌，其中，主要是陰溝腸桿菌(17/49)，其次是大腸埃氏希菌(15/49)。單種菌株產ESBLs率前三位是陰溝腸桿菌(17/30，56.6％)，大腸埃氏希菌(15/40，37.5

4、％)，肺炎克雷伯(6/24，25.0％)。各病區(qū)中神經科產ESBLs分離率最高(32.7％)。 3、按照NCCLS/CLSI推薦的表型確證法檢測陰溝腸桿菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌等菌的ESBLs與三維法進行比較，其準確率低于50％。 4、本院2005年5月～9月從175株革蘭陰性桿菌中分離并確認產ESBLs菌49株，質粒DNA提取后經PCR擴增，產物測序符合TEM、SHV、CTX-M耐藥基因型序列。PCR產物聚丙烯酰

5、胺凝膠電泳結果提示，34株出現TEM型陽性條帶，5株出現SHV型、16株出現CTX-M型陽性條帶，11株無條帶。 結論：1、本院院內感染革蘭陰性桿菌對臨床常用抗生素均有較高的耐藥率，耐藥性逐年上升。 2、陰溝腸桿菌、大腸埃希菌是主要產ESBLs的革蘭陰性桿菌。神經科是主要產ESBLs菌的病區(qū)。 3、臨床微生物實驗室采用三維法測定陰溝腸桿菌、鮑曼不動桿菌、銅綠假單胞菌ESBLs更準確。 4、蘭州大學第二醫(yī)院