耐碳青酶烯類(lèi)肺炎克雷伯菌產(chǎn)酶耐藥機(jī)制及同源性分析.pdf

1、目的：
　　篩選重慶某三級(jí)醫(yī)院臨床分離耐碳青霉烯類(lèi)肺炎克雷伯菌產(chǎn)酶耐藥菌株，并對(duì)產(chǎn)酶機(jī)制及耐藥菌株同源性進(jìn)行分析，為臨床治療和控制耐碳青霉烯類(lèi)肺炎克雷伯菌(CRKP)提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　收集重慶某三級(jí)醫(yī)院2003年-2013年臨床分離肺炎克雷伯菌200株。用PCR的方法通過(guò)擴(kuò)增khe基因?qū)赀M(jìn)行鑒定；常規(guī)藥敏紙片試驗(yàn)及MIC值測(cè)定篩選出CRKP；用改良 Hodge試驗(yàn)和改良Carba NP試驗(yàn)篩選出產(chǎn)碳青

2、霉烯酶菌株；PCR擴(kuò)增耐藥基因并對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序?qū)Ρ?；質(zhì)粒結(jié)合實(shí)驗(yàn)研究細(xì)菌耐藥基因的傳播方式；用MLST和PFGE方法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行同源性分析。
　　結(jié)果：
　　從臨床收集的肺炎克雷伯菌中共篩選出22株CRKP，大部分對(duì)厄他培南不敏感。22株CRKP中有6株產(chǎn)酶表型陽(yáng)性且產(chǎn)B類(lèi)酶，常見(jiàn)的產(chǎn)酶耐藥基因擴(kuò)增結(jié)果顯示，6株攜帶耐藥基因，經(jīng)測(cè)序和網(wǎng)上比對(duì)結(jié)果顯示，其中1株產(chǎn)酶菌株攜帶NDM-1基因，1株攜帶IMP-4基因，4株攜帶I

3、MP-8基因。6株產(chǎn)酶菌株質(zhì)粒結(jié)合試驗(yàn)均成功。MLST和PFGE對(duì)產(chǎn)酶菌株進(jìn)行分子分型，6株CRKP表現(xiàn)出大小不一的同源性，6株產(chǎn)酶肺炎克雷伯菌一共分為4個(gè)基因型。
　　結(jié)論：
　　CRKP有多種耐藥機(jī)制，產(chǎn)碳青霉烯酶是最常見(jiàn)的耐藥機(jī)制之一。該醫(yī)院產(chǎn)碳青霉烯酶耐藥菌主要攜帶耐藥基因IMP-8、IMP-4、OXA-1，并且耐藥基因可以通過(guò)質(zhì)粒進(jìn)行傳遞。MLST和PFGE的結(jié)果顯示此醫(yī)院有主要的流行菌株，應(yīng)引起臨床各科室和醫(yī)院感