碳青霉烯類(lèi)耐藥肺炎克雷伯菌耐藥機(jī)制及同源性研究.pdf

1、肺炎克雷伯菌是院內(nèi)獲得性感染中最為常見(jiàn)的致病菌之一，主要引起肺炎、敗血癥、尿路感染、肝膿腫及腹膜炎等。隨著抗菌藥物的廣泛使用，尤其是碳青霉烯類(lèi)抗生素的大量或不合理使用，碳青霉烯類(lèi)耐藥肺炎克雷伯菌（Carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia，CRKP）呈現(xiàn)全球播散趨勢(shì)，在我國(guó)分離率逐年攀升，對(duì)臨床治療帶來(lái)極大挑戰(zhàn)。本研究旨在探討本院CRKP院內(nèi)感染相關(guān)危險(xiǎn)因素和耐藥機(jī)制，并分析其同源性和院內(nèi)感染流行

2、現(xiàn)狀，為CRKP的防控提供科學(xué)的理論依據(jù)。
　　本研究收集了來(lái)自本院8個(gè)臨床科室的30株CRKP，制定統(tǒng)一調(diào)查表收集臨床資料并進(jìn)行分析。采用紙片擴(kuò)散法進(jìn)行常見(jiàn)藥物的體外敏感性實(shí)驗(yàn)，并用改良Hodge試驗(yàn)檢測(cè)所有菌株是否產(chǎn)碳青霉烯酶。所有菌株均利用脈沖場(chǎng)凝膠電泳(Pulsed field gel electrophoresis，PFGE)和多位點(diǎn)序列分型(Multilocus sequencetyping，MLST)兩種技術(shù)進(jìn)行同源

3、性分析，部分菌株進(jìn)行全基因組測(cè)序(Wholegenome sequencing，WGS)分析親緣關(guān)系遠(yuǎn)近。
　　臨床資料顯示30位感染患者的平均年齡較高（72±15歲），各項(xiàng)病情評(píng)分指標(biāo)均顯示病情嚴(yán)重。基礎(chǔ)疾病中神經(jīng)系統(tǒng)疾病、糖尿病和心力衰竭患者占了前三位。而有90％的患者在三個(gè)月內(nèi)使用過(guò)β-內(nèi)酰胺酶抑制劑合劑，50％多的患者使用過(guò)碳青霉烯類(lèi)。近三個(gè)月內(nèi)絕大多數(shù)患者曾留置導(dǎo)管，例如導(dǎo)尿管、深靜脈導(dǎo)管和氣管導(dǎo)管等。體外藥物敏感性實(shí)驗(yàn)

4、顯示所有菌株對(duì)美羅培南和厄他培南耐藥，除一株對(duì)亞胺培南為中介外其余也全部耐藥。對(duì)三、四代頭孢、復(fù)合制劑所有菌株均耐藥。而對(duì)環(huán)丙沙星、慶大霉素和阿米卡星的耐藥率分別是90.0％、97.0％和87.0％。所有菌株對(duì)多粘菌素E和替加環(huán)素均無(wú)耐藥。耐藥酶基因檢測(cè)結(jié)果提示30株肺炎克雷伯菌在攜帶blaKPC-2的同時(shí)均帶有blasHV。此外，有部分菌株還同時(shí)帶有blaCTX-M和blaTEM。PFGE將所有菌株分為A～H8個(gè)克隆群，主要有2個(gè)克隆

5、群出現(xiàn)院內(nèi)播散，分別是A和C克隆群。MLST分析得到5種序列型（Sequence type，ST），其中23株屬于ST11，3株屬于ST437，2株屬于ST290，另外兩株分別為ST133和ST15。5株A克隆(ST11)菌株的全基因組測(cè)序?qū)?株細(xì)菌分為3個(gè)不同的群組（2株∶2株∶1株），同一群組的菌株為一簇，親緣關(guān)系密切，單獨(dú)的那株自成一簇，與前兩簇關(guān)系疏遠(yuǎn)。因此，WGS較PFGE和MLST更深入的揭示了菌株的遺傳背景，更利于菌株的溯

6、源追蹤。
　　綜上所述，CRKP感染患者具有多種危險(xiǎn)因素，患者預(yù)后情況與多種危險(xiǎn)因素和治療相關(guān)。初始經(jīng)驗(yàn)性抗感染治療應(yīng)根據(jù)感染危險(xiǎn)因素進(jìn)行選擇，并及時(shí)綜合分析患者病情，結(jié)合藥敏結(jié)果進(jìn)行目標(biāo)治療。產(chǎn)肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶（Klebsiella pneumoniae carbapenemase，KPC）2型是本院CRKP耐藥的重要原因，多種耐藥基因的共同攜帶導(dǎo)致其多重耐藥表型。ST11型克隆播散是本院感染流行的重要原因，應(yīng)加強(qiáng)醫(yī)院感染